Искусственного введения спермы у насекомых (кроме пчел) в целях гибридизации еще не производилось, почему описывать подробно довольно кропотливую методику введения спермы пчелиным маткам мы здесь не будем — принципиальных отличий она не имеет и особенности связаны лишь с необходимостью работать под бинокулярной лупой. Музалевский и Лысенко дали более простой способ (Музалевский, и Козлов 1933).
Рис. 36. Сбор спермы петуха пипеткой (по Никитиной).
Разбавление спермы
Тесным образом с проблемой введения спермы связан вопрос о разбавлении и хранении спермы
. Необходимость разбавления спермы часто диктуется двумя соображениями.Рис. 37. Впрыскивание спермы курице (по Никитиной).
1. Получение спермы у самцов обычно сопряжено со значительной затратой сил и времени, почему возникает настойчивая потребность полученную сперму использовать для осеменения максимально возможного количества самок. Это сокращает затрату труда и времени на осеменение одной самки и позволяет вести работу в более широком масштабе, что для многих задач гибридизации чрезвычайно важно.
2. Во многих случаях сперма получается в столь ничтожном количестве, что с ней технически трудно манипулировать. Так, птицы дают вообще эякулят, не превышающий 0,5–1,0 см3
. При добывании спермы хирургическим путем из эпидидимиса количество спермы (масса сперматозоидов) может быть еще меньше. Наконец при гибридизации с редкими видами в распоряжении гибридизатора может находиться всего один самец, каждым эякулятом которого приходится крайне дорожить.Проблема разбавления спермы в настоящее время в значительной степени разрешена, в особенности работами Милованова и др., и быстро совершенствуется. Выяснено в первую очередь для млекопитающих, что изотонические растворы фосфатов, сульфатов и тартратов в смеси с изотоническим раствором глюкозы являются средой, при помощи которой можно во много раз разбавить сперму либо вовсе без вреда для ее оплодотворяющей способности либо лишь со слабым ее понижением.
Так как у каждого вида свое осмотическое давление спермы, которое иногда довольно заметно отличается от других видов, то для получения наилучших результатов для каждого вида должен быть подобран специфический разбавитель.
Приводимая таблица показывает состав разбавителей для домашних млекопитающих.
Для барана
(ГФО-2)1. Глюкоза безводная — 64,0
— Вода дестилированная — 1000,0
2. Натрий фосфорнокислый однозамещ. — 41,0
— Калий фосфорнокислый однозамещ. — 1,7
— Кальций фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Магний фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Вода дестилированная — 1 000,0
Для быка
(ГФК-3)1. Глюкоза безводная — 57,0
— Вода дестилированная — 1000,0
2. Натрий фосфорнокислый двузамещ. — 36,7
— Калий фосфорнокислый однозамещ. — 1,4
— Натрий сернокислый безводный — 1,7
— Кальций фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Магний фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Вода дестилированная — 100,0
Для жеребца
(СГЛ-2)Глюкоза безводная — 57,6
Натрий сернокислый безводный — 3,4
Пептон (без солей) — 2,0
Вода дестилированная — 1000,0
Для быка
(СГК- 2)Глюкоза безводная — 12,0
Натрий сернокислый безводный — 13,6
Пептон (без солей) — 5,0
Вода дестилированная — 1000,0
Оба раствора хранятся отдельно и перед употреблением смешиваются в отношении 1:1.
Для птиц разбавителем могут быть жидкие фракции яичного белка, отсасываемые пипеткой[29]
.Хранение спермы
Проблема хранения спермы представляет для гибридизации огромное значение, почему разрешению этой проблемы, еще далекой от разрешения, должно быть уделено самое серьезное внимание. Значение этой проблемы обусловлено следующим.
1. Даже небольшой эякулят спермы содержит в нормальных случаях огромное количество сперматозоидов, число которых в 1 см3
достигает сотен миллионов (у утки до 1/2 млрд.). Поэтому одного такого эякулята при возможности его хранения могло бы хватить для большого количества самок, даже полагая на каждое осеменение хотя бы по 10 000 000 сперматозоидов против одного необходимого для оплодотворения. Длительное храпение спермы дало бы возможность наиболее рационального и полного использования эякулятов. Между тем благодаря нашему неумению хранить сперму многие эякуляты получают ничтожное использование, так как оказывается невозможным иметь одновременно достаточно большое количество самок, годных для осеменения по своему физиологическому состоянию (наличию течки и т. п.).