В Центральной Италии только в 1235 г. была впервые сделана серьезная попытка ввести инквизицию; доминиканцам Витербо папа предоставлял право во всех епархиях Тосканы, Витербо, Орты, Бальнеореджио, Кастро, Соано, Америно и Нарни не наказывать тех еретиков из непризнанных таковыми открыто, которые добровольно принесут повинную, если епископы отпустят грехи, а ими будет дан достаточный залог. Участь тех еретиков, которые не покаются добровольно, должна быть решена согласно папским статутам. В 1237 г. папа осудил в Витербо Джованни да Беневенто, прозванного «папой еретиков», а также много других еретиков; он велел разрушить дворцы нескольких знатных фамилий, давших у себя приют еретикам. В Парме в то время генерал доминиканского ордена Иордан основал общество Рыцарей Иисуса Христа для борьбы с ересью. Под энергичным руководством инквизитора Руджиери Калканьи во Флоренции росло число казней. Еретиков сжигали и в других местностях; преследование становилось энергичным всюду, где это позволяло политическое положение. В 1244 г. упоминается о двух сожженных в Пизе. Во Флоренции Руджиери раскрывал все новых еретиков; преследования становились все более многочисленны и все более суровы, папские грамоты предписывали синьории исполнять приказания инквизитора. Вскоре добрая треть населения, в том числе и много знатных людей, подверглась преследованию. Руджиери арестовал многих вождей еретиков и приговорил признанных виновными к сожжению на костре. Преследуемым приходилось выбирать между открытым сопротивлением или гибелью.
Барони собрали своих сторонников и освободили заключенных, которые рассеялись по разным укрепленным замкам флорентийской области. Иннокентий IV требовал от синьории оказывать инквизиторам содействие. По призыву папы из Ломбардии во Флоренцию прибыл в конце 1244 г. Петр Веронский. Он образовал из католической знати военный орден Св. Марии для защиты доминиканцев и инквизиции. Получив поддержку, Руджиери сжег много жертв. Еретики объединились под управлением Барони и получили поддержку от только что назначенного Фридрихом II подестатом Сер Паче ди Пезаннола из Бергамо, так как в интересах его повелителя было покровительствовать еретикам. Руджиери заставил Барони 1 августа 1245 г. принести присягу на верность Церкви и внести залог в тысячу лир. Но так как Руджиери этим не удовлетворился и готовился произнести над ними приговор, Барони подали апелляцию подестату. 12 августа Сер Паче послал к Руджиери своих чиновников с приказанием прекратить процесс, как противоречащий приказу императора, вернуть взятые в виде залога деньги, а в случае отказа пригрозил инквизитору штрафом в тысячу марок. В ответ Руджиери вызвал к себе самого Сер Паче как подозреваемого в ереси и покровителя еретиков под угрозой обвинения в злоупотреблении по должности и увольнения со службы. Подестат велел ударить в набат. Много безоружных католиков было убито в тот день у подножия алтарей. В день св. Варфоломея, 24 августа, Руджиери и епископ Ардинго осудили Барони и постановили конфисковать их имения и разрушить их замки и дворцы. Это послужило сигналом к кровавому столкновению между двумя партиями. Еретики потерпели полное поражение, во Флоренции было уничтожено могущество еретиков и гибеллинов. В конце 1245 г. обязанности инквизитора перешли к самому Петру. Многие из гонимых Петром еретиков отказались от своих заблуждений, другие бежали из города. Петр победил ересь и прочно основал инквизицию.
Смерть Фридриха II 13 декабря 1250 г. избавила папство от самого страшного врага, который один только мешал папам в их честолюбивых планах захватить господство над всей Италией и основать всемирную теократическую монархию. Покровительство, которое Фридрих оказывал еретикам, долго мешало деятельности инквизиции в Италии; теперь это препятствие было устранено. Были разосланы инквизиторы во все местности Ломбардии. Петру Веронскому и Вивиану Бергамскому Иннокентий IV своим бреве от 8 июня 1251 г. вручил полные полномочия и предписал отправиться в Кремону; сеньоров надлежало принудить к поддержке инквизиторов угрозой духовных наказаний, а если это окажется недействительным, то христианский мир должен начать крестовый поход, чтобы уничтожить мятежных. Вскоре последовало несколько других булл, обращенных к доминиканским провинциалам и главам государств: папа требовал от них деятельной помощи и внесения во все местные статуты декретов против еретиков, изданных покойным императором и папами. Деятельность папы увенчалась изданием 15 мая 1252 г. буллы «Об истреблении»; папа стремился подчинить гражданскую власть инквизиции и уничтожение ереси ставил первой задачей государства.