Руководство к практическим занятиям по биохимии. Учебное пособие для студентов специальностей «Ветеринария» и «Ветеринарно-санитарная экспертиза»

7. Нажмите клавишу «#» на панели управления. В нижней части светового табло на верхней строке появится надпись «Градуировка» (8), а через 3–5 секунд надпись «Измерение». На нижней строке появится измеренное значение оптической плотности холостой пробы (воды), например «А = 0,000» (9). Оно должно составлять 0,000±0,002. Если значение А имеет большее отклонение от нуля, необходимо повторно провести градуировку (нажать «#»).

8. Ручку перемещения кювет установите вправо до упора. Через несколько секунд на нижней строке появится значение оптической плотности исследуемого раствора, например «А = 0,230» (10). Запишите полученное значение оптической плотности в рабочую тетрадь.

9. После завершения работы выключите прибор нажатием тумблера «Сеть» и отключите прибор из сети.

2. ТЕРМОБЛОК

Термоблок предназначен для нагревания проб в пробирках и виалах в заданном температурном режиме.

ВАЖНО: прибор работает без заполнения ячеек водой. Заполнение водой опасно для жизни!

Термоблок ПЭ-4020. Общий вид.

1 – тумблер «Сеть»

2 – кнопка «Установка/работа»

3 – кнопки установки температуры

4 – ячейки для пробирок

5 – световое табло

6 – световой индикатор работы

Правила работы с прибором

1. Включите тумблер «Сеть» (1). Тумблер загорится красным светом.

2. Используя кнопки установки температуры (3) выставите на световом табло (5) требуемый температурный режим.

3. Нажмите кнопку «Установка/работа» (2). После этого начнется нагрев ячеек. Световой индикатор работы (6) станет мигать красно-зеленым цветом, а на световом табло высветится текущая температура в ячейках, которая будет постепенно увеличиваться, пока не достигнет заданного значения. После этого термоблок будет работать в режиме поддержания заданной температуры.

4. После достижения заданной температуры установите пробирки с исследуемыми растворами в ячейки термоблока (4) и оставьте их в течение необходимого срока инкубации.

5. После завершения работы выключите прибор нажатием тумблера «Сеть» и отключите прибор из сети.

Правила пользования автоматической пипеткой переменного объема

УСТАНОВКА ОБЪЕМА ДОЗИРОВАНИЯ

1. Объем дозирования отображается на цифровом дисплее на рукоятке пипетки (рис. 1).

2. Требуемый объем устанавливается вращением операционной кнопки, расположенной наверху пипетки (рис. 2). Чтобы увеличить объем дозирования, поверните операционную кнопку против часовой стрелки, чтобы уменьшить объем – по часовой стрелке.

3. Убедитесь, что цифры, показывающие объем дозирования, целиком видны в окне дисплея и установлены до щелчка.

4. Запрещается устанавливать объем, выходящий за границы диапазона дозирования пипетки. Прилагая чрезмерное усилие при выкручивании операционной кнопки за пределы диапазона дозирования, Вы можете сломать детали внутреннего механизма, что приведет к поломке пипетки.

ТЕХНИКА ПИПЕТИРОВАНИЯ

А – исходное положение

В – первая остановка

С – вторая остановка

1. Нажмите на операционную кнопку до первой остановки (В). 2. Погрузите наконечник в раствор примерно на глубину 1 см и плавно отпустите кнопку (А).

3. Извлеките наконечник, аккуратно снимая излишки раствора о край резервуара.

4. Выпустите взятый раствор, плавно нажимая на кнопку до первой остановки (В). После примерно секундной паузы нажмите операционную кнопку до второй остановки (С). После выполнения данной операции наконечник должен полнocтью опустошиться.

5. Отпустите кнопку в исходное положение, если необходимо, смените наконечник и продолжайте пипетирование.

Всегда нажимайте и отпускайте операционную кнопку плавно.

Упор на пипетке должен опираться на указательный палец. При работе ВСЕГДА удерживайте пипетку в строго вертикальном положении!

Раздел 1. Простые и сложные белки. Нуклеиновые кислоты. Ферменты, коферменты, витамины

1.1. Семинар «Химия белков, аминокислоты»

Белки – это высокомолекулярные соединения, молекулы которых построены из остатков аминокислот, составляют основу структурных элементов клеток и тканей, а также выполняют многообразные жизненно важные функции (транспортные, защитные, регуляторные, каталитические), обусловленные способностью за счет своей уникальной пространственной структуры распознавать другие молекулы и взаимодействовать с ними.

Аминокислоты в молекуле белка соединены между собой пептидными связями (-CO-NH-), образуя полипептидные цепи. Пептидная связь возникает между карбоксильной группой одной аминокислоты и аминогруппой другой аминокислоты, при этом отщепляется молекула воды.