Судебная медицина

Чтобы выяснить видовую принадлежность крови, вырезают маленький кусочек материала вещественного доказательства со следом крови и кусочек из расположенного рядом участка материала без крови (контроль, позволяющий убедиться в том, что в материале отсутствует белок не кровяного происхождения). Эти кусочки размельчают ножницами, помещают в отдельные пробирки, куда приливают незначительное количество физиологического раствора хлорида натрия, и оставляют на определенный срок (от нескольких часов до нескольких суток, в зависимости от растворимости крови) в рефрижераторе при температуре от +4° до +8°. Полученные вытяжки отделяют от материала (отсасывают пастеровскими пипетками), центрифугируют или фильтруют, до полной прозрачности. При помощи пробы с азотной кислотой, проводимой в целях экономии объекта капиллярным способом, устанавливают, перешел ли в раствор белок из следа крови, и в положительном случае разводят эту вытяжку физиологическим раствором до содержания белка приблизительно 1:1000; вытяжку из контрольного участка предмета-носителя не разводят. К обеим вытяжкам, а также к физиологическому раствору, которым производили экстрагирование объектов, добавляют сыворотку, преципитирующую белок человека, к другим порциям тех же ингредиентов - сыворотку, преципитирующую, например, белок лошади, к третьим порциям - сыворотку, преципитирующую белок другого животного (свиньи, собаки и т. д.). Если осадок в виде диска белого цвета образуется только при взаимодействии вытяжки из следа крови и сыворотки, преципити-рующей белок человека, а в жидкостях, находящихся во всех остальных пробирках, осадки отсутствуют, эксперт делает вывод, что кровь в следе на вещественном доказательстве произошла от человека. Выпадение осадка лишь в пробирке с вытяжкой из следа крови, куда была добавлена сыворотка, преципитирующая белок лошади, свидетельствует о том, что кровь принадлежит лошади, и т. д.

Рис. 40. Реакция преципитации в геле (агаре):

а) вытяжка из пятна крови, 6) вытяжка из контрольного участка, в) сыворотка, преципи-тирующал белок человека

Перед применением преципитирую-щих сывороток проверяют титр (крепость) и специфичность (действие, в пределах определенного срока и разведений, только с белком человека или животного того или иного вида) каждой из них.

Реакцию преципитации осуществляют в специальных пробирках с коническим нижним концом; преципитирующую сыворотку опускают пастеровской пипеткой на дно пробирки с вытяжкой, т. е. подслаивают под последнюю.

Помимо описанной реакции преципитации в жидкой среде имеется ее модификация - реакция в гелеобразной среде. На стекло тонким слоем наносят растительное студневидное вещество - агар; по застывании в нем делают три лунки, куда помещают вытяжку из следа крови, вытяжку из контрольного участка материала вещественного доказательства и сыворотку, преципитирующую тот или иной вид белка. Если применена сыворотка, преци-питирующая белок человека, а след на вещественном доказательстве был образован человеческой кровью, между лунками с вытяжкой из следа и преципитирую-щей сывороткой через определенный срок появится осадок в виде полосы (иногда несколько полос) белого цвета (рис. 40). То же произойдет при взаимодействии вытяжки из следа крови свиньи и сыворотки, преципити-рующей белок свиньи, и т. д. Вместо вытяжек из следа крови и контрольного участка предмета-носителя в лунки можно помещать непосредственно соответствующие кусочки материала вещественного доказательства, добавляя к ним капли физиологического раствора.

Реакция преципитации в геле менее чувствительна, чем реакция в жидкой среде, но в некоторых случаях обладает преимуществами. Она может быть проведена с мутными объектами и дает перспективы успешного и более доступного дифференцирования крови филогенетически близких животных, например крупного и мелкого рогатого скота; лося и быка.

Для определения видовой принадлежности крови существуют и другие реакции, но они не получили распространения в отечественной судебномедицинской практике, требования которой, как правило, полностью удовлетворяются применением реакции преципитации (преципитирующие сыворотки, изготовляемые в нашей стране, обладают высокими качествами, а схема реакции преципитации хорошо разработана).