Порошок плохо оседает при декальцификации, даже при центрифугировании. Кроме того, чтобы добиться состояния порошка, надо либо использовать особые мельницы с охлаждением, либо пилить, что приводит к избыточному разогреванию материала. Удобнее работать с мелкими опилками.
Возможно ли выделить ДНК из обгоревших костей (есть кости черепа, зубы и позвонки) и установить совпадение с родственниками (матерью)?
Возможно, если в позвонках остался спинной мозг (выделяла фенолом, ДНК целое ведро). Зубы можно, но лезет много лишнего.
Кости могут обгореть в разной степени. Есть варианты, когда генетике делать уже нечего. Иногда ДНК получается из обгоревших костей даже лучше, чем из всякого рода других костей. Надо попробовать на ощупь кости. Если легко крошатся, то и зубы не помогут.
Вопрос к уважаемому Цезарю. Почему вы отказались от обработки перекисью? В чём смысл обработки этиловым спиртом? Я полагал, что обработка перекисью преследует две цели: во-первых (и главная) избавиться от возможной поверхностной контаминации чужеродной ДНК, во-вторых уничтожение микроорганизмов. Но в чём смысл и задача обработки этиловым спиртом? Вопрос не праздный. Мне приходится работать с фрагментами костей свода черепа. Черепа коллекционные, а значит когда-то вываренные, матриксной ткани мало и меня здорово смущает воздействие на ДНК объекта в губчатой ткани, находящийся между двумя тонкими слоями матриксной кости.
Мы просто исторически никогда не использовали перекись. Кроме мягких, омывающих процедур используются достаточно грубые физические воздействия, когда скальпелем или наждачкой снимается верхний слой костной ткани. Такой метод, вероятно, не подойдёт для рыхлых исторических образцов – там придётся как-то нежно погружать в серию растворов. Во всех остальных случаях нас устраивает конечный результат положительного генотипирования, поэтому мы не меняем сложившуюся методику. Да, спирт. Спирт ведёт к обезжириванию костных фрагментов, что крайне существенно для дальнейшей успешной декальцификации. Мы убираем только часть жиров, но зачастую на поверхности кости их слишком много, чтобы этим пренебрегать. И что может случиться с ДНКой? Она не вымоется спиртом, так как находится внутри клеток, которые не то чтобы оторвать от основы – добраться до них не так просто.
Кости черепа (исключая нижнюю челюсть) самые непростые для выделения ДНК, тем более, когда череп варился. К вам вопрос: какой срок хранения черепов перед ДНК анализом? Каков процент успешного генотипирования? И, если есть какие-то наработки, из каких костей черепа успешнее выделять ДНК?
Спасибо уважаемому Цезарю за оперативный ответ. Насчёт наработок говорить ещё рано, сделано два черепа. Костный материал был взят из свода черепа. Вначале пытался использовать выпилы из нижней челюсти, но два раза из первой кости получил смесь профилей. Прежде чем отказываться от исследования, взял ещё материал из свода черепа и получил хорошие данные. Второй череп сразу брал из свода черепа. В обоих случаях имелись образцы по одному из ближайших родственников. Профиль получен полный и совпадение с образцами по аллеям как по учебнику. Сегодня взят в работу ещё один череп. Местные криминалисты пугают 105 черепами, накопленными за последний десяток лет.
Выходило, что преступник что-то слышал о том, что ДНК проще добыть из костей нижней челюсти и зубов, но всё-таки недостаточно разбирался в этом вопросе. Возможно, что преступник – человек, связанный с медициной. Оставалось ждать экспертизы, которая, возможно, прольёт свет на это запутанное дело.
Глава 21
Мать Нади отказывалась верить, что нашли останки её дочери. Семья выставила в интернете объявление о том, что они не верят, что девочки больше нет и что будут продолжать искать Наденьку. Маргарита интересовалась у участников группы по поиску её дочери, как она может отказаться от результатов генетической экспертизы. Приводила различные доводы о том, что экспертиза может быть не точной и что она будет до конца верить в то, что Надя жива и когда-нибудь вернётся домой.
Время шло. Мало кто надеялся, что экспертиза даст какой-то результат и поможет найти преступника. Ведь прошло столько времени с момента смерти девочки и тело нашли не полностью, а только часть. Что там могло сохраниться? Пахло очередным «висяком».
27 мая в СМИ появилось сообщение:
«Сегодня ночью сотрудники уголовного розыска отдела полиции «Зеленогорский» задержали подозреваемого в убийстве школьницы Нади Тимофеевой. Сейчас он находится в изоляторе временного содержания. Информации о личности задержанного, подозреваемого в убийстве Нади Тимофеевой, – пока минимум. Всё по грифом «секретно». Со СМИ следователи общаются осторожно, взвешивая каждое слово. Всё ради того, чтобы проделанная работа не пошла насмарку.
Основанием для задержания стали полученные результаты генотипоскопической экспертизы. Биологические следы, оставленные на вещах ребёнка, на 99,9% совпали с биологическим образцом (слюной), взятым у одного из жителей города.