Микроскопическое исследование мокроты с окраской мазка по Цилю-Нильсену является наиболее быстрым, доступным и экономически эффективным методом выявления пациентов, больных туберкулезом.
Бактериоскопическое исследование обладает высокой специфичностью (89–100%). Около 57%. положительных результатов микроскопии подтверждаются результатами посева. Тем не менее, поскольку в природе существует большое число морфологически сходных с МБТ нетуберкулезных кислотоустойчивых микроорганизмов, микроскопическое исследование позволяет дать заключение лишь о наличии или отсутствии в препарате кислотоустойчивых бактерий (КУБ). При микроскопическом исследовании мазка патологического материала определить видовую принадлежность выявленных кислотоустойчивых бактерий нельзя.
Разрешающая способность микроскопического исследования по Цилю-Нильсену составляет от 5 до 10 тысяч микобактерий в I мл мокроты.
Методы микроскопии мокроты
С целью диагностики туберкулеза используют 2 метода микроскопического исследования:
1. метод прямой-микроскопии, когда мазок готовят непосредственно из диагностического материала;
2. метод микроскопии осадка, полученного из обработанного деконтаминантом материала для культурального исследования.
Лучшие результаты микроскопического исследования получают при концентрировании диагностического материала центрифугированием. Такое исследование проводят в лабораториях, осуществляющих бактериологическую диагностику туберкулеза.
Для исследования мазков, окрашенных но Цилю-Нильсену, используют световой бинокулярный микроскоп с иммерсионным объективом (90- или 100-кратное увеличение) и окуляром с 7- или 10-кратным увеличением. Исследуют 100 полей зрения, что достаточно для выявления в мазке единичных микобактерий. В случае, если результат исследования 100 полей зрения отрицательный, рекомендуется просмотреть еще 200 полей зрения.
Результаты микроскопического исследования оценивают количественно (табл. 2.3).
Результат исследования | Минимальное число полей зрения, обязательных для просмотра | Форма записи результата | Интерпретация результата исследования |
---|---|---|---|
КУБ не обнаружены в 300 полях зрения | 300 | Отр. | Отрицательный |
1–2 КУБ в 300 полях зрения | 300 | Рекомендовано повторить исследование | Результат не оценивают |
1–9 КУБ в 100 полях зрения | 100 | «_» КУБ в 100 полях зрения (указывается точное число) | Положительный |
10–99 КУБ в 100 полях зрения | 100 | 1 + | Положительный |
1–10 КУБ в 1 поле зрения | 50 | 2+ | Положительный |
10 КУБ в 1 поле зрения | 20 | 3+ | Положительный |
В лабораториях, выполняющих большое количество микроскопических исследований (100 и более ежедневно), может использоваться люминесцентная микроскопия.
Особенности бактериоскопии при внелегочном туберкулезе
Для бактериоскопической диагностики внелегочного туберкулеза осуществляют прямую микроскопию диагностического материала (плевральной, спино-мозговой жидкости), а также микроскопию мазков, приготовленных после обогащения с последующей окраской по Цилю-Нильсену или люминесцентными красителями. Прямая микроскопия мазков менее эффективна в связи с низкой концентрацией микобактерий в материале, поэтому рациональнее использовать методы обогащения, в частности, центрифугирование. Помимо этого, проводится посев материала для культуралыюго исследования.
Бактериоскопия мочи, менструальной крови не проводится, в связи с крайне низкой результативностью исследований.
Значение культуральных исследований для выявления возбудителя туберкулеза
Культуральное исследование (посев) диагностического материала на МБТ, благодаря высокой чувствительности (от 20 до 100 жизнеспособных клеток в 1 мл исследуемого материала) и специфичности в сочетании с микроскопическим методом, является «золотым стандартом» в диагностике туберкулеза. Как уже указывалось ранее, культуральное исследование выполняется лабораториями П, III уровня, а также Республиканской референс-лабораторией, являющимися структурными подразделениями государственных организаций здравоохранения, оказывающих медицинскую помощь в стационарных (амбулаторных) условиях.
Культуральное исследование с последующем определением ТЛЧ для положительных образцов проводится для всех пациентов, больных ТБ или с подозрением на ТБ, перед началом лечения противотуберкулезными лекарственными средствами.