Пять литров красного. Что необходимо знать о крови, ее болезнях и лечении

Перед тем как поместить стекло под микроскоп, мазки крови окрашиваются специальным красителем. Сам метод окрашивания клеток крови, как уже отмечалось, предложил Пауль Эрлих. На эту мысль его натолкнула прочитанная им книга про отравление свинцом, где отмечалась способность этого токсичного элемента накапливаться в определенных тканях. Эрлиха настолько увлекла тема окрашивания биологических тканей, что его научный руководитель представил своего студента светилу бактериологической науки Роберту Коху (1843‒1910), причем следующим образом: «Это маленький Эрлих. Он очень хорошо окрашивает, но никогда не сдаст экзамен». Экзамены Эрлих все же сдал и даже защитил докторскую диссертацию, посвященную окрашиванию биологических структур недавно открытыми синтетическими красителями. Предложенный Эрлихом в 1877 году метод основывался на использовании двух красителей – фуксина и метиленового синего, проявляющих соответственно кислотные и основные свойства. Попытки Эрлиха окрасить клетки крови морских свинок сначала были безуспешными, но как-то раз он отлучился, а подкрашенная капля успела высохнуть, и под микроскопом Эрлих увидел окрашенные клетки; так выяснилось, что следует подкрашивать высохшую кровь. В 1888 году патологоанатом Одесской городской больницы Чеслав Иванович Хенцинский (1851‒1916) предложил использовать для окраски малярийного плазмодия смесь эозина (еще один кислотный краситель) и метиленового синего. Однако такое окрашивание не выявляло ядро плазмодия, и в 1890 году врач Дмитрий Леонидович Романовский (1861‒1921), работавший в петербургском Николаевском военном госпитале, начал экспериментировать с этой смесью и обнаружил, что если применять длительно хранившийся в растворе метиленовый синий, то составной краситель дает полихромную (многоцветную) окраску клеток. Он высказал предположение, что это объясняется наличием какого-то третьего вещества, но, не будучи химиком, ограничился простой догадкой. Вещество, названное азуром, образующееся при окислении метиленового синего, выделил немецкий химик Густав Гимза в 1902 году и наладил серийное производство реактива (эозин-азур-метиленовый синий) под названием «Giemsasche Lözung für die Romanowsky Färbung» («Раствор Гимзы для окраски по Романовскому»), так что метод получил название «Окрашивание по Романовскому‒Гимзе»[15].

Рис. 8. Окрашенный мазок крови

Составной краситель, как я уже говорил, состоит из нескольких химических соединений – щелочной (основные, или базовые, красители) и кислой (кислотные красители) реакции, под воздействием которых составляющие клеток крови (кислотной или основной природы) по-разному окрашиваются. Таким образом становится легче определить их морфологию – строение и форму.

Окрашивание применяется в основном, чтобы выявить разные виды лейкоцитов. Эритроциты и тромбоциты имеют характерное строение, и оценить их морфологию довольно легко. А вот разные виды лейкоцитов достаточно сходны между собой: только когда мы их окрашиваем, они начинают выглядеть по-разному.

Например, гранулы внутри эозинофилов окрашиваются в оранжево-розовый цвет. Они являются структурами основной (щелочной) природы и получили название в честь кислотного красителя, который их так окрашивает, – эозина. А он, в свою очередь, носит имя древнегреческой богини утренней зари Эос.

Гранулы базофилов, напротив, окрашиваются в интенсивный сине-фиолетовый цвет. Они представляют собой структуры кислой природы, поэтому окрашиваются базовыми красителями, отсюда и название.

Ядра лейкоцитов красятся в фиолетово-красный цвет, и некоторые виды лейкоцитов получили свои названия из-за разной формы под микроскопом, например палочкоядерные и сегментоядерные.

Рис. 9. Мазок крови под микроскопом

Осторожно сдвигая окрашенный мазок в поле зрения микроскопа, врач считал клетки каждого вида (отличающиеся по форме ядра, цвету цитоплазмы и гранул) и их общее количество. Насчитав в совокупности 100, он получал требуемое процентное соотношение каждого вида клеток. Для облегчения подсчета использовались счетчики лейкоцитарной формулы с отдельными клавишами для каждого вида клеток. Если обнаруживались какие-либо отклонения от нормы, обязательно просматривали еще 100 лейкоцитов.

И да, после этих процедур все использовавшиеся при конкретном анализе скарификаторы, пробирки, капилляры, пипетки промывались, заворачивались в крафт-бумагу и стерилизовались при температуре 180 ºС в сухожаровом шкафу.

Современные процедуры клинического анализа крови