Гистологическое исследование
при донованозе выявляет выраженный акантоз и псевдоэпителиоматозную пролиферацию. В дерме обнаруживаются воспалительные инфильтраты, состоящие в основном из плазматических клеток и гистиоцитов. Несмотря на то что исследование импрегнации серебром позволяет эффективно выявлять специфические тельца в срезах, диагноз чаще всего удается установить при исследовании мазков, приготовленных из материала, полученного при биопсии грануляционной ткани с периферии очага. Кусочки материала растирают между стеклами, высушивают, в качестве фиксатора используют метиловый спирт и окрашивают по Райту– Гимзе. Тельца Донована обнаруживаются в виде округлых коккобацилл размером от 1 до 2 мкм, располагающихся в цитоплазме больших мононуклеарных клеток. Капсула окрашивается как плотная ацидофильная зона, которая благодаря краевому скоплению хроматина напоминает английскую булавку. Патогномоничная мононуклеарная клетка – от 25 до 90 мкм в диаметре и имеющая в цитоплазме многочисленные кистозные полости со специфическими тельцами Донована.Культуральный метод
используется редко. Материал с места поражения культивируется на желточных мешках куриных эмбрионов, а затем происходит гистологическая идентификация возбудителя.Лабораторные методы
: методика ПЦР на настоящий момент до конца не разработана и нуждается в дальнейшей апробации с использованием материала из различных географических зон.
Хламидиоз
Хламидиоз вызывается Chlamydia trachomatis – наиболее распространенным из микроорганизмов, передающихся половым путем. Вид C. trachomatis имеет 15 серотипов. Серотипы A, B, Ba и C вызывают трахому, три из них – L1, L2, L3 – венерическую лимфогранулему (ВЛГ), остальные серотипы (D – K) вызывают воспалительные заболевания гениталий и перинатальные инфекции. Хламидии характеризуются особым жизненным циклом, начинающимся с поражения чувствительных клеток путем специфического процесса поглощения хламидий клетками хозяина. Первый шаг инфекционного процесса – прикрепление элементарного тельца-хламидии (ЭТ) к клетке хозяина. В основном поражается нереснитчатый цилиндрический или кубический эпителий. После прикрепления следует вызываемый ЭТ фагоцитоз. Внутри клетки ЭТ находится в цитоплазме в виде фагосомы, а поверхностные антигены микроба задерживают распад фагосомы. Далее ЭТ видоизменяется в метаболически активное сетчатое тельце (СТ), способное к делению. СТ неинфекционно и существовать вне клетки не может. СТ делятся 8—24 ч, конденсируются и преобразуются в новые ЭТ. Через 3 суток клетка разрушается, и ЭТ распространяются во внешнюю среду. Так начинается новый этап размножения хламидий. У мужчин первично поражается уретра, следом – другие органы (предстательная железа, семенные пузырьки, придатки яичек). Наиболее распространен первичный хламидийный уретрит, причем около 20 % мужчин не имеют клинических симптомов заболевания. У женщин чаще поражается канал шейки матки, а за этим может возникнуть и восходящая инфекция, поражающая матку, маточные трубы, яичники. Хламидийная инфекция может поражать шейку матки и уретру одновременно. Инфекция из мочеиспускательного канала может проникать в мочевой пузырь, вызывая цистоуретрит.
Культуральный метод
является стандартом. Для транспортировки применяется среда (сукрозосульфат), которая содержит антибиотики: нистатин, ванкомицин, гентамицин. Среда с пробой остается охлажденной, посев в среду культивирования рекомендуется провести в пределах суток. Культура клеток (Мак-Коя) с пробой хранится от 24 до 72 ч, а затем проводятся окрашивание (йодом, помеченными флуоресцином моноклональными антителами) и микроскопия. Чувствительность метода – около 70 %, при повторном пассаже через среду культивирования выявляется еще от 10 до 20 % случаев инфицирования.Серологические реакции
регистрируют не саму бактерию, а последствия ее пребывания в организме. Известно, что микроорганизм или его антигенные компоненты могут не выявляться в месте первоначальной инфекции. Но тем не менее при хронической инфекции время от времени высвобождаются антигены хламидий из клеток, в результате чего индуцируется гуморальный ответ и накопление специфических сывороточных антител, которые выявляются следующими исследованиями: реакцией связывания комплемента – РСК, иммуноферментным анализом (ИФА), реакцией непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ), реакцией непрямой гемагглютинации (РНГА), непрямым иммунопероксидазным анализом (IPA), реакцией микроиммунофлуоресценции (МИФ).