Серологические методы
. Наиболее часто используется поиск антител методом иммуносорбции (ELISA). Данный метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, но на ранних этапах инфекции антитела отсутствуют (так называемый феномен «окна»). Прогностическая ценность ELISA зависит от распространенности ВИЧ в обследуемой группе и снижается в общей популяции с невысокой частотой инфекции. При положительном результате теста следует проводить проверочные исследования (к примеру, Western blot-метод хроматографии на геле, изолирующий ВИЧ-антигены: белки сердцевины и оболочки вируса). Можно применять поиск антигенов вируса с использованием моноклональных антител. «Окно» существует только несколько недель, но иногда сохраняется до 6—14 месяцев перед сероконверсией.ИФА
. При постановке ИФА в случае положительного заключения анализ с той же сывороткой проводится еще 2 раза в той же тест-системе. При получении хотя бы еще одного положительного заключения сыворотка направляется в референс-лабораторию, где дополнительно исследуется в другой тест-системе. При получении положительного результата диагностика ВИЧ-инфекции продолжается более специфичным методом иммунного блоттинга (ИБ), позволяющим выявить антитела к отдельным белкам ретровируса. При отрицательном заключении сыворотка повторно изучается в третьей тест-системе. В данной ситуации в зависимости от результатов последнего тестирования либо выдается заключение об отсутствии антител к ВИЧ, либо сыворотка направляется на исследование в ИБ. Результаты, полученные в иммунном блоттинге, могут интерпретироваться как положительные (обнаруживаются антитела к 2 или 3 гликопротеинам возбудителя – gp41, gp120, gp160 для ВИЧ-1 и gp36, gp105, gp140 для ВИЧ-2), отрицательные (отсутствуют антитела к какому-либо антигену) и сомнительные (выявляются антитела к одному гликопротеину и (или) любым протеинам – p17, p24, p31, p51, p55, p66 для ВИЧ-1 и p18, p26, p56, p68 для ВИЧ-2). При отрицательном заключении анализа в ИБ выдается заключение об отсутствии антител к ВИЧ. При получении сомнительного результата обследуемому назначается динамическое наблюдение, а также проводятся повторные исследования на антитела к вирусу через 3 месяца и при сохранении определенных результатов – еще через 3 месяца. Если через 6 месяцев после первого обследования вновь будут получены сомнительные результаты и у пациента не будут выявлены клинико-эпидемиологические признаки ВИЧ-инфекции, то результат расценивается как ложноположительный. Только после положительного результата в ИБ возможно заключение об инфицированности лица ВИЧ.ПЦР
. Особую ценность для диагностики ВИЧ имеет ПЦР в начале болезни – еще до появления антител, когда инфицирование уже произошло, а также на поздних стадиях заболевания, когда количество антител может снижаться вплоть до полного исчезновения. Однако чувствительность метода ПЦР в целом на 1–2 % ниже, чем чувствительность ИФА. В свою очередь, это может приводить к появлению ложноотрицательных результатов. Специфичность ПЦР во многом определяется качеством используемых в наборе ингредиентов, особенно праймеров.В настоящее время наиболее важным прогностическим критерием инфекции стал показатель РНК ВИЧ. Показано, что риск развития СПИД и смерти прямо связан с исходным показателем РНК ВИЧ в крови. Этот показатель оказался информативнее, чем число СД-4 лимфоцитов. Определение показателя РНК ВИЧ позволило оценить выживаемость пациентов: при уровне менее 5000 копий/мл прогнозируемая длительность жизни превышала 10 лет; при показателе 5—13 тыс. копий/мл средняя продолжительность жизни составила 9,5 г.; при уровне 13–36 тыс. копий/мл – 7,4 г.; при уровне более 36 тыс. копий/мл – 5,1 г.
Микоплазменная и уреаплазменная инфекции
Возбудители этой группы инфекций – микоплазмы – одни из самых мелких прокариотов. Согласно классификации их причисляют к семейству Mycoplasmataceae. Это семейство дифференцируют на 2 рода – Mycoplasma, включающий в себя около 100 видов, и Ureaplasma, насчитывающий 3 вида. Микоплазмы, паразитирующие у человека, бывают 5 видов – M. pneumonie, M. genitalium, M. hominis, M. incognitis, U. urealiticum. Микоплазмы – группа мелких микроорганизмов (150–200 нм), имеющих способность к размножению на бесклеточных средах.