(до июня 1939 г. заказ № 48) Без приемных испытаний вошла в состав 4-го ДПЛ Первой эскадры Шестого флота и до июля 1941 г. занималась боевой подготовкой. В конце октября 1941 г. I-24 включили в состав Специальной группы ПЛ капитана 1 ранга Ханку Сасаки и до 25.11.1941 г. на подходах к бухте Токуяма (на юго-востоке о. Хонсю) она занималась боевой подготовкой. 18.11.1941 г. корабль пришел в Куре, где на арсенале флота принял на борт карликовую лодку типа А. 25.11.1941 г. I-24 направилась к Гавайским о-вам 5.12.1941 г. она заняла позицию в 100 милях к западу от о Оаху. 6.12.1941 г. в восьми милях от берега корабль направил свою карликовую лодку в гавань Перл-Харбор для атаки боевых кораблей противника. 7.12.1941 группа Сасаки не добилась каких-либо результатов. 9.12.1941 г. I-24 оставила район ожидания и 13.12.1941 г. пришла на атолл Кваджелейн. 3.01.1942 г. она направилась к Гавайским о-вам для борьбы с кораблями противника. 9.01.1942 г. ПЛ приступила к поискам американского соединения во главе с АВ Saratoga. 10.01.1942 г. на подходах к о. Оаху корабль, будучи в надводном положении, обнаружил американский АВ Lexington. I-24 около двух суток пыталась выйти в торпедную атаку, но 12.01.1942 г., из-за деформации клапанов вентиляции носовой группы ЦГБ, прекратила преследование. Экипажу корабля удалось самостоятельно устранить повреждения. 18.01.1942 г. ПЛ получила приказ следовать к атоллу Мидуэй, а затем — к Перл-Харбор для поиска района, где можно было бы произвести дозаправку топливом летающих лодок "Каваничи" H8K1. 20.01.1942 г. I-24 приняла топливо на атолле Вотье и 22.01.1942 г. выпустила шесть 140-мм снарядов по атоллу Мидуэй. В результате обстрела (в темное время суток, по счислению) на нефтяном терминале возник пожар (по докладу командира). ПЛ прекратила огонь из-за противодействия береговых батарей и затем направилась к рифам Френч-Фригейт. 1.02.1942 г. она пришла на атолл Кваджелейн. 9.03 1942 г. I-24 направилась в район к юго-западу от Гавайских о-вов для борьбы с судоходством противника. 15.03.1942 г. она получила приказ следовать в Метрополию и 27.03.1942 г. пришла в Сасебо. 28.03.1942 г. ПЛ включили в состав 3-го ДПЛ Восьмой эскадры ПЛ Шестого Флота. 2.04.1942 г. корабль направился к Соломоновым о-вам для противодействия попыткам создания на о. Тулаги американской базы. 18.04.1942 г. I-24 получила приказ следовать в район к востоку от о. Бонин для перехвата американских АВ, нанесших удар по Токио. 27.04.1942 г. она пришла на атолл Трук. 30.04 1942 г. ПЛ направилась в район к юго-западу от Соломоновых о-вов для обеспечения наступления армейских частей на Новой Гвинее. 17.05.1942 г. на подходах к атоллу Трук корабль безрезультатно атаковала американская ПЛ Tautog. В тот же день он пришел на атолл Трук. 23.05.1942 г. I-24 направилась к побережью Австралии, имея на борту карликовую лодку типа А. 31.05.1942 г. корабль направил ее в гавань Сиднея. Карликовая лодка не добилась каких-либо результатов и была потоплена при попытке атаковать американские боевые корабли. 2.06.1942 г. I-24 (капитан 3 ранга Ханабуса) оставила район ожидания и 6.06.1942 г. у северного побережья Австралии потопила американское торговое судно (4312 т) и торпедой повредила австралийское торговое судно (5800 т). 12.06.1942 г. ПЛ с дистанции шесть миль выпустила по портовым сооружениям Сиднея 10 140-мм снарядов. На подходах к гавани Сиднея она атаковала союзный конвой и торпедами повредила два торговых судна (суммарным водоизмещением 10004 т). 27 06.1942 г. корабль возвратился на атолл Трук. 28.08.1942 г. I-24 направилась к Соломоновым о-вам для борьбы с судоходством противника. 22.10.1942 г. она пришла в Рабаул. 24.10.1942 г. ПЛ, являясь флагманом 3-го ДПЛ (капитан 2 ранга Ота), направилась к о-вам Санта Круз для поиска и атаки боевых кораблей противника. 1.11.1942 г. I-24 возглавила Специальное соединение капитана 2 ранга Ота, призванное атаковать американские боевые корабли у Лунга-Пойнт. 5.11.1942 г. лодка пришла на атолл Трук и 9.11.1942 г. направилась к Соломоновым о-вам, имея на борту карликовую лодку типа А. 15.11.1942 г. корабль вошел в пролив Индиспенсейбл, но по техническим причинам (у карликовой лодки сломался двигатель и она начала заполняться водой) прекратил операцию и 17.11.1942 г. прибыл в Рабаул. 1.01.1943 г. I-24 включили в состав 1-го ДПЛ Восьмой эскадры Шестого флота. С 6-го по 24.04.1943 г. ПЛ перешла в Метрополию с заходом на атолл Кваджелейн (10.04.1943 г.). В Сасебо на верфи флота провели текущий ремонт корпуса и механизмов. 13.05.1943 г. корабль включили в состав Специального соединения контр-адмирала Кондо, призванного противостоять наступлению противника на Алеутских о-вах. 19.05.1943 г. он прибыл на о. Парамушир. 8.06.1943 г. I-24 направилась к о. Кыска, имея на борту 6 т различных грузов (вместо части запасных торпед и артиллерийского боезапаса). 11.06.1943 г. ПЛ в 50 милях к северо-западу от о. Атту обнаружил и потопил глубинными бомбами американский противолодочный корабль РС 487.