Определение антитромбоцитарных антител путем иммунофлюоресцентного исследования в суспензии тромбоцитов иммуноглобулина, связанного с этими клетками (метод Диксона).
Этот метод позволяет дифференцировать иммунные и неиммунные тромбоцитопении.Определение продолжительности жизни меченых аутологичных тромбоцитов
позволяет разграничивать тромбоцитопении с нормальной продолжительностью жизни тромбоцитов в циркуляции (около 9 суток) и формы заболевания с укороченной продолжительностью жизни этих клеток. Первые чаще всего связаны со снижением продукции тромбоцитов в костном мозге, вторые – с их ускоренной гибелью, либо с действием антитромбоцитарных антител (при аутоиммунных тромбоцитопениях продолжительность жизни тромбоцитов сокращается до нескольких часов), либо с интенсивной убылью этих клеток в агрегаты и тромбы при ДВС‑синдроме или массивных тромбозах (тромбоцитопении потребления).Количественное определение содержания в плазме крови до и после агрегации ряда тромбоцитарных факторов
– этот метод важен для идентификации ряда тромбоцитопатий (нарушении сохранности гранул и их компонентов, пареза реакции освобождения этих компонентов, повышения содержания их в плазме крови вследствие интенсивной внутрисосудистой адгезии и агрегации тромбоцитов).Методы исследования свертывающей системы крови.
Данные методы подразделяются на следующие группы:
1) ориентировочные (общие), дающие представление о состоянии коагуляционного каскада в целом и отдельных его этапов;
2) дифференцирующие дефицит отдельных факторов – коррекционные коагуляционные тесты;
3) количественного определения отдельных компонентов системы по их функциональной активности (коагуляционные пробы, исследования на хромогенных и других субстратах) и/или по иммунологическим маркерам;
4) выявления внутрисосудистой активации процесса свертывания крови и фибринолиза по функциональным признакам или молекулярным маркерам такой активации.
Таким образом, при оценке состояния свертывающей системы крови (табл. 8–10) используются как собственно коагуляционные методики (лабораторные и инструментальные), составляющие основу диагностического процесса, так и иммунологические, радионуклидные и другие виды исследования. При этом во многих случаях компоненты системы могут определяться как по функциональной активности, так и иммунологически – по содержанию соответствующего антигена в крови. Параллельное использование таких методик позволяет дифференцировать формы патологии, связанные с отсутствием синтеза соответствующего фактора свертывания и формы, при которых молекула фактора синтезируется, но она аномальна и функционально неполноценна.
Определение времени свертывания крови
(предпочтительнее методика Ли – Уайта) – давно применяющийся быстровыполнимый (непосредственно у постели больного) ориентировочный тест, позволяющий выявлять значительные нарушения свертываемости крови, связанные с дефицитом факторов гемокоагуляции (кроме фактора VII) или с действием антикоагулянтов и фибринолитиков. Тест сравнительно низкочувствительный, показатели его нарушаются лишь при выраженном снижении содержания в плазме факторов свертывания (ниже 4–5 %), в связи с чем непригоден для выявления легких форм гемофилии А и В , а также нарушений свертываемости крови при ангиогемофилии, дефиците фактора XI, прекалликреина и высокомолекулярного кининогена. По этим причинам тест не может использоваться для предоперационного обследования больных: при нормальных показателях теста (5–10 мин) возможно возникновение профузных послеоперационных кровотечений.Силиконовое время плазмы
– это время рекальцификации плазмы, полученной в условиях силиконирования игл, пробирок, пипеток, то есть при минимальной контактной активации. Нормативные показатели зависят от используемого силикона и определяются исследованием крови здоровых людей для каждого его образца отдельно.Индекс контактной активации
– это соотношение времени свертывания крови по Ли – Уайту в силиконовой и несиликоновой пробирках. Повышенная контактная активация наблюдается при нарушении функций печени, недостатке факторов Хагемана, Флетчера и Фитцджеральда, избытке антикоагулянтов. Пониженная контактная активация наблюдается при гиперкоагуляционной фазе ДВС‑синдрома.