Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2008 №3

В МЭКХ можно добавлением мочевины влиять на коэффициент распределения и, как следствие, на селективность. Аналогичные эффекты можно получить добавлением органических модификаторов к водной фазе. Речь идет об органических растворителях, смешиваемых с соответствующим буфером. Однако добавками модификаторов можно влиять не только на полярность подвижной фазы. Это приводит также к изменениям ЭОП и свойств мицелл. Влияние органических модификаторов в МЭКХ представлено на рис. 78.

Рис. 78.Влияние органических модификаторов в МЭКХ.

Селективность можно также улучшить добавлением солей и образованием, тем самым, комплексных соединений.

На примере разделения смеси производных аминокислот флуоренилметилоксикарбонилов (ФМОК) можно показать возможности оптимизирования в методе МЭКХ. На рис. 79 показано разделение 11 ФМОК-аминокислот.

Рис. 79.Разделение смеси 11 ФМОК-аминокислот методом КЗЭ.

_{Капилляр: 50мкм х 50/75 см, буфер: бора г 50 мМ, pH 9.5: УФ-детектирование 200 нм; поле 330 В/см.}

Из-за относительно большого и одинакового для всех проб вклада нейтральных производных электрофоретическая подвижность производных очень схожа и поэтому их полное разделение вряд ли возможно.

Добавлением ДДСН к буферу при прочих равных условиях, как показано на рис. 80, достигается лучшее разделение.

Рис. 80.Разделение 16 ФМОК-аминокислот методом МЭКХ.

_{Идентификация пиков — в буквенном коде для аминокислот. Буфер: 50 мМ борат, 50 мМДДСН, pH 9.5.}

Добавлением органических компонентов к буферу можно еще лучше оптимизировать разделение. На рис. 81 показано разделение проб при идентичных условиях за исключением того, что в данном случае к буферу добавлен метанол. Эта добавка влияет на равновесное распределение пробы между буфером и мицеллой, при этом изменяется также ЭОП и растворимость пробы в буфере.

Рис. 81.Разделение 16 ФМОК-аминокислот методом МЭКХ с добавлением метанола к буферу.

_{Буфер: 50 мМ борат, 50 мМ ДДСН, pH 9.5, об. 10 % метанола.}

Принцип разделения МЭКХ может применяться также в хроматографическом методе с обращением фаз. В качестве примера на рис. 82 показано разделение смеси компонентов взрывчатых веществ, в состав которых обычно входят незаряженные производные нитробензола.

Рис. 82.Разделение компонентов взрывчатых веществ (ароматических нитросоединений).

_{Условия прибор КЭ типа HP 3D СЕ; капилляр: 50 мкм, 47/55 см, поле: 363 В/ см; буфер: 2.5 мМ борат, 50 мМ ДДСН, pH 8.7; ввод пробы — электрокинетический 5 кВ, 2 с; детектирование: ячейка детектора 150 мкм, 250±20 им; проба: 2-амино-б-нитротолуол, 2-амино-2,6-нитротолуод, 2-нитротолуол, 3-нитротолуол, 4-нитротолуол, 1,3-динитробензол, 1,2-динитробензол, 2,6-динитротолуол, 2,4-динитротолуол, нитробензол, 2,4,6-тринитротолуол.}

11. Разделение энантиомеров

Разделение энамтиомеров представляет собой одну из важнейших областей аналитической химии. Хотя энантиомеры и относятся друг к другу как изображение и его зеркальное отражение и не различаются по своим физико-химическом свойствам, один из энантиомеров вращает поляризованный свет направо, в то время как его зеркальное отражение — налево (т. е. они проявляют оптическую активность). Смесь эквимолярных количеств пары энантиомеров не проявляет оптической активности, поскольку направления вращения света противоположны.

Если смесь энантиомеров, которую необходимо разделить, добавить к оптически активной среде, состоящей из чистого энантиомера, то в разделяющей системе поведение анализируемых веществ будет очень различным, что позволяет осуществить их разделение. Различное поведение можно объяснить тем, что в оптически активной среде с оптически активным окружением взаимодействует только один из энамтиомеров, в то время как его зеркальное отражение не взаимодействует. Если различие во взаимодействиях достаточно велико, смесь энамтиомеров разделяется на чистые компоненты.