Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2008 №3

Основной вклад в уширение полос в ВЭЖХ дают параболический профиль скоростей и диффузия в порах стационарной фазы. Одной из возможностей уменьшения этого вклада в уширение полос является уменьшение диаметра частиц, однако при этом возрастает перепад давления. В идеальном случае ЭОП в наполненном капилляре не зависит от размера частиц наполнителя. Кроме того, поршнеобразная форма профиля скоростей ЭОП способствует высокой разделительной способности. Поэтому пытаются соединить высокую селективность заполненной разделительной колонки ВЭЖХ с "остротой" разделения, свойственной КЭ. В данном случае основополагающие принципы разделения и стационарные фазы те же, что в ВЭЖХ, однако транспорт элюентов (водно-органических буферных растворов) и компонентов пробы обеспечивается миграцией под действием электрического поля. Для уменьшения вклада сорбционных процессов в уширение полос применяют очень маленькие непористые частицы (1 мкм). Следует отметить, что до настоящего времени в литературе нет реальных примеров применения, а есть только теоретические работы. Многообещающие теоретические предсказания до сих пор не подтверждены экспериментально. Получаемые малые ВЭТТ лишь незначительно отличаются от полученных в ВЭЖХ. Одной из причин этого может быть проблема детектирования. В КЭ детектируют с помощью разделяющего капилляра, в наполненной колонке это уже невозможно. Таким образом, дополнительно возникают известные в микро-ВЭЖХ проблемы, связанные с подключением детектора к разделяющему капилляру.

Рис. 107.Разделение с помощью ЭХ в капилляре, наполненном обращенной фазой. Последовательность элюирования: тио-мочевина, бензиловый спирт, бензальдегид, бензол, 1,2-дихлорбекзод, 1,2,3-трихлорбензол, 1,2,3,4-тетрахлорбензод, пентахлорбензол, гексахлорбензол.

_{Условия разделения: длина капилляра 28.5 см, 50 мкм, наполнитель — Hypersil ODS (3 мкм), ввод пробы: 2.5 кВ в течение 5 с, наложенное поле 45 кВ (2 мкА), детектирование при 220 нм, подвижная фаза — 2 мМ динатрийтетраборат, 80 % апетонитрил, pH 8.7.}

16. Перспективы

В таблице 31 представлены описанные разделительные системы, применение которых основано на миграции, обусловленной электрическим полем. Наиболее часто применяемой системой является, конечно, КЭ в кварцевых капиллярах (открытых трубках) с незаполненными или поверхностно-модифицированными стенками капилляра. Нейтральные молекулы также могут быть разделены в этих системах с помощью добавок мицеллообразователей.

По сравнению с классическим электрофорезом КЭ имеет следующие преимущества:

— очень высокая эффективность разделения;

— простое детектирование в режиме реального времени и возможность количественного анализа;

— простота хранения;

— короткие времена анализов;

— возможность автоматизации;

— небольшой расход реактивов.

По сравнению с ВЭЖХ преимущества заключаются в следующем:

— высокая эффективность разделения;

— быстрое установление равновесия при изменении условий анализов.

Недостатки КЭ заключаются в следующем:

— детектирование УФ-детекторами с низкой чувствительностью к изменению концентрации;

— относительно плохая воспроизводимость и сложность управления ЭОП;

— адсорбция анализируемых веществ на стенках капилляра, приводящая к потере эффективности.

В настоящее время коммерчески доступны приборы, некоторые из них — второго поколения, позволяющие проводить рутинные измерения, Это отражается также на характере публикаций число работ, ориентированных на практику, перекрывает число чисто методических или теоретических работ. В 1990 году в обзоре по аналитической химии под рубрикой "Капиллярный электрофорез" приведены только 225 работ, из которых более половины относились к 1988/89 годам, а в обзоре за 1990/91 годы приведены уже 523 публикации.

Появились также первые монографии и обзорные работы.

_{Рекомендуемые книги:}

_{J.Vindevogel, P.Sandra, Introduction to МЕКС, in: Chromatographic Methods, Hutig Verlag, Heidelberg 1992}

_{Editor: NAGuzman, Capillary electrophoresis technology, in Chromatographic science series, Volume 64, M.Dekker, Inc., New York-Basel-Hong Kong 1993}

_{S.F.Y. Li, Capillary electrophoresis, in J. Chromatogr. Library, Vol.52, Elsevier, Amsterdam 1992}