Очерки из жизни пресноводных животных

Многие пресноводные животные прозрачны и потому являются весьма удобными для микроскопирования в живом состоянии; у мелких рачков (дафнии) и других животных можно наблюдать биение сердца, движения кишечника, работу конечностей, процедуру принятия пищи, работу жабр и многое другое, но для этого объект наблюдения необходимо лишить подвижности, дабы он во все время работы оставался в поле зрения микроскопа. В зависимости от величины объекта это достигается разными способами.

Объект помещают под покровное стекло на восковых ножках; осторожным давлением на углы стекло опускают до соприкосновения с поверхностью тела наблюдаемого животного; если последнее толсто, то его кладут на предметное стекло с углублением или приготовляют особую стеклянную камеру, наклеивая канадским бальзамом отрезки стекла требуемой толщины на предметное стекло.

Для наблюдения простейших их движения замедляют давлением покровного стекла на ножках или же на предметное стекло кладут несколько переплетающихся волокон ваты, наносят каплю воды с объектами и наблюдают их в камерах, образованных перекрещивающимися волокнами ваты.

Приготовление тотальных препаратов без предварительной подготовки

Для сохранения мелких животных (например, членистоногих) и различных стадий их развития в целях последующего изучения изготовляют постоянные микроскопические препараты, без какой-либо особой обработки, по схеме: обезвоживание объекта и заключение его в канадский бальзам.

Объект фиксируется 70% спиртом (если он уже был законсервирован в водном растворе формалина, то его с час промывают водой и потом переносят часа на 2-3 в 70% спирт). Препарат прокалывают где-нибудь острой иглой, чтобы дать возможность спирту проникнуть через отверстие в хитине внутрь объекта.

Препарат переносят последовательно в 85% и затем в 95% спирт, выдерживая в каждом из них, в зависимости от величины объекта, часов по 6 (в 95% спирту можно оставить препарат на ночь).

Препарат переносят на сутки в абсолютный алкоголь для обезвоживания. Для заключения в канадский бальзам препарат необходимо пропитать насквозь маслом; такое "просветление" производится гвоздичным или кедровым маслом.

В узкую короткую пробирку с плоским дном наливают гвоздичного или кедрового масла на 1 см, осторожно приливают сверху абсолютного спирта, так чтобы обе жидкости не смешивались друг с другом. В спирт опускают обезвоженные препараты, которые задерживаются в зоне соприкосновения спирта с маслом. Пробирку оставляют стоять в покое до тех пор, пока препараты не опустятся на самое дно, что совершается медленно в связи с диффузией в пограничной зоне. Пипеткой отсасывают спирт и перекладывают препараты на несколько часов в чистое масло в часовом стекле.

По окончании описанных процедур контролируют прозрачность препарата. Часовое стекло ставят на черную доску стола. Препарат должен быть невидимым; если на нем видны белесоватые пятна, значит обезвоживание было неполное, и препарат необходимо вернуть обратно в абсолютный спирт.

Если препарат прозрачный, то его на шпателе переносят на середину предметного стекла и поливают несколькими каплями ксилола из капельницы, чтобы смыть масло.

Сообразуясь с толщиной препарата, вырезают две узкие полоски белого картона или берут кусочки спичек или обламывают кусочки вытянутой стеклянной трубочки и кладут их но бокам препарата так, чтобы они пришлись к самым краям покровлого стекла.

Не давая препарату высохнуть, наносят на него палочкой канадский бальзам и накрывают препарат начисто вытертым покровным стеклом. Если бальзама взято мало, то прибавляют каплю его с краю покровного стекла, под которое он втягивается в силу капиллярности.

Поправляют иглами положение сдвинувшихся опорных полосок ("ножек") и оставляют препарат на долгое время сохнуть в горизонтальном положении, подбавляя канадский бальзам по мере его усыхания с краев.

Такие заключенные в толстый слой канадского бальзама препараты целесообразнее хранить в горизонтальном положении, так как при долгом держании их на боку объект опускается к нижнему краю покровного стекла даже спустя несколько месяцев после его изготовления.

Вследствие толщины препарата, его можно изучать только при слабых увеличениях микроскопа.

Если препарат в канадском бальзаме был совершенно прозрачен, а через некоторое время он частично или полностью почернел, при рассматривании в проходящем свете микроскопа, значит он не был достаточно проколот перед обезвоживанием (см. выше § 1), из него испарился ксилол, а бальзам внутрь не прошел. Ценные препараты можно попытаться исправить по следующей схеме:

растворить бальзам ксилолом и выдержать препарат в чистом ксилоле;

перенести (осторожно, препарат очень хрупок) в 100% спирт для обезвоживания;

проколоть осторожно препарат иглой; после суточного пребывания в 100% спирту повторяют последовательно § 4-9 настоящей главы.