Вскоре Бисмарку удалось еще раз оставить Австрию с носом. Конфликт разгорелся вокруг двух маленьких герцогств — Шлезвига и Голштинии, расположенных на севере Германии, у датских границ. Дания и Пруссия вступили в спор за эти земли, которые формально находились под юрисдикцией датской короны, но были населены в основном немцами и входили в Германский союз. Берлину удалось склонить на свою сторону Вену, где считали претендента на голштинский престол принца Аугустенбурга опасным либералом. В возникшем конфликте Пруссия и Австрия выступили единым фронтом, Дания потерпела поражение, а оба герцогства в 1864 г. были оккупированы прусскими и австрийскими войсками — но основные плоды победы пожала Пруссия.
В качестве приманки на встрече с Рехбергом в августе 1864 г. Бисмарк предложил проект долгосрочного австро-прусского альянса, направленного против Франции и Италии. «Железный канцлер» знал больные места австрийцев: Франц Иосиф не переставал грезить о возвращении Ломбардии, а его ненависть к новоиспеченному итальянскому королю Виктору Эммануилу II подогревалась тем фактом, что в ходе объединения Италии младшие ветви Габсбургов, правившие в Тоскане и Модене, лишились своих владений. Австро-прусский блок — прототип союза 1879 года — не возник пятнадцатью годами раньше по причине чрезмерной рискованности этого проекта. Зато Рехбергу его игры с Бисмарком стоили карьеры: в октябре 1864 года министр был уволен.
Обстановка в Германии продолжала накаляться. Император не желал конфликта с Пруссией, но ее поведение становилось все более дерзким. Берлинская бюрократия тормозила ход переговоров о принятии Австрии в германский таможенный союз, а тем временем Бисмарк проводил ускоренное перевооружение прусской армии. «В данных условиях союз с Пруссией является единственно правильным решением, — размышлял Франц Иосиф, — но мы обязаны продолжать наши неблагодарные усилия к тому, чтобы направить Пруссию на правильный путь и удерживать ее в пределах правовых норм». Загвоздка, однако, была в том, что для Бисмарка правовые нормы представляли собой ценность лишь до тех пор, Пока соответствовали прусским интересам.
К началу 1866 года «железный канцлер», очевидно, пришел к выводу, что Пруссия достаточно сильна для того, чтобы Навсегда отбить у Австрии охоту претендовать на роль лидера германских государств. В разговоре с начальником прусского генштаба генералом фон Мольтке Бисмарк без обиняков заявил: «Условия, сложившиеся в Германии... после упадка, который пережил в последние годы престиж всех союзных институций, более чем когда-либо нуждаются в обновлении, соответствующем справедливым чаяниям нации...» На общедоступном языке это означало: война. 8 апреля 1866 г. был заключен тайный прусско-итальянский союзный договор сроком на три месяца. Бисмарк позаботился о том, чтобы Австрия подверглась нападению как с севера, так и с юга.
В Вене (впрочем, как почти всегда) к войне оказались не готовы. В техническом отношении из-за хронической нехватки бюджетных средств австрийская армия уступала прусской: Франц Иосиф только разворачивал программу перевооружения, так что у его войск не было в достаточном количестве ни ружей новых систем, ни артиллерии, столь же дальнобойной, как у пруссаков. Редкая сеть железных дорог не справлялась с переброской воинских частей. Вдобавок вновь проявилась вечная беда Австрии — неудачные кадровые решения. Командующим Северной армией, которая должна была выступить против Пруссии, был назначен генерал Людвиг фон Бенедек, воевавший в свое время под началом Радецкого и, по его собственным словам, знавший каждое дерево на дороге в Милан. Ему было самое место в Южной армии, разворачивавшейся против итальянцев, однако командовать ею отправился эрцгерцог Альбрехт.