Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2007 №9

борцы за экологию призывают производителей бумаги отбеливать бумажные волокна перекисью, а не хлором. Опять же, нельзя полностью исключать того, что перекись может вызывать образование других опасных веществ, когда она реагирует с органическими материалами в грибных субстратах, хотя я считаю это весьма маловероятным. Например, аэробные организмы прошли через миллионы лет эволюции, окруженные перекисью и имея ее внутри себя. Перекись образуется в процессе нормального аэробного метаболизма и формируется в естественных условиях при реакции воды с кислородом под воздействием солнечного ультрафиолета. Это означает, что аэробные организмы, скорее всего, приобрели метаболический механизм, позволяющий безопасно иметь дело с различными продуктами окисления, которые образуются в результате реакции перекиси с биологическим материалом. Кроме того, перекись водорода в стерилизованных грибных субстратах ведет себя химически стабильно, а концентрация перекиси, которую мы будем использовать, так низка, что реакции окисления в субстрате должны быть весьма незначительными. Наконец, я ни разу не наблюдал мутагенного или токсического влияния субстрата, обработанного перекисью, на мицелий или плодовые тела грибов. Агаровые среды, содержащие перекись водорода, дают превосходные, здоровые ореолы мицелия, а конечные плодоносящие культуры производят такие же замечательные грибы, как и при использовании традиционных методов культивирования.

Стабильность

3% раствор перекиси, имеющийся в продаже в супермаркетах и аптеках, содержит стабилизатор на основе фосфорной кислоты и достаточно хорошо сохраняется в прохладном месте. После добавления перекиси водорода к стерилизованной и охлажденной среде, перекись, очевидно, разлагается с невысокой скоростью. Точное значение времени, в течение которого перекись сохранит свои свойства, вероятно, определяется сложной зависимостью, включающей состав среды, концентрацию перекиси и температуру. Тем не менее, мой опыт показывает, что перекись обеспечивает защиту от заражений в течение достаточно длительного времени, чтобы различные виды грибов успели безопасно колонизировать субстрат.

С другой стороны, перекись водорода не следует добавлять в горячую среду, если только вы не собираетесь скомпенсировать потерю перекиси при разложении, добавляя большее его количество. В связи с тем, что перекись приобретает свойства отбеливателя при температуре выше 60 °C, она будет легко разлагаться при контакте с комплексными органическими материалами при температурах от 60 °C и выше. Таким образом, перед добавлением перекись вам придется подождать, пока среда остынет — если не до комнатной температуры, то хотя бы до такой, которую терпит рука.

В противовес своему поведению в чистом растворе или стерилизованной среде, перекись быстро разлагается в присутствии перекисеразрушающих ферментов, как это случается при промывании раствором перекиси ран. Разрушенные клетки кожи и кровеносных сосудов, находящиеся в ране, в изобилии содержат перекисеразрушающие ферменты, что вызывает быстрый распад перекисного раствора и выделение пузырьков кислорода. Похожие ферменты, называемые каталаза и пероксидаза, найдены во всех разновидностях живых или бывших живыми тканях, если только они не подвергались температурному воздействию или глубокой переработке. Таким образом, необработанное зерно, мука, опилки, дерево и т. д. будут разлагать перекись за короткое время. Это означает, что вам придется избегать контакта раствора перекиси с подобными материалами при хранении. Это также означает, что если вы хотите включить указанные материалы в состав питательной среды, вам придется удостовериться в том, что перед добавлением перекиси все компоненты среды были подвергнуты тщательной тепловой обработке с целью уничтожения перекисеразрушающих ферментов.

Я предпринимаю определенные меры для обеспечения чистоты раствора перекиси при его хранении. Перед забором перекиси я, в первую очередь, протираю пробку и верхнюю часть бутылки спиртовым раствором, чтобы удалить частицы, которые могут содержать живые микроорганизмы.

После этого я либо отливаю перекись в пастеризованный мерный цилиндр, либо отбираю раствор с помощью чистой, пастеризованной пипетки, снабженной на верхнем конце ватным тампоном-фильтром. Пипетки не нуждаются в автоклавировании, но их требуется, как минимум, обрабатывать в течение нескольких минут кипятком (заполняя выше верхней градуировочной отметки, но ниже ватного тампона), а затем остужать перед тем, как производить забор перекиси.

Градуированный цилиндр объемом 100 мл может послужить удобным сосудом для погружения 10 мл пипетки в кипяток. Нагревание убьет все живые организмы, а перекись уничтожит оставшиеся термоустойчивые споры. Я также слежу за тем, чтобы не допускать закручивания пробки на бутылке, если пробка контактировала с источником заражения.

Различия в концентрации перекиси, поступающей от производителей