Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2007 №9

В первом томе «Выращивание грибов простым способом» я объяснил, как невидимое микробное загрязнение может расти на культуре мицелия выращенного методом с применением перекиси. Там же я представил метод очистки от этих загрязнений путем проращивания культуры мицелия через непитательный агар. На «косяках» невидимая инфекция должна расти немного медленнее, чем на чашках Петри. Но, в конечном счете, все равно происходит накапливание инфекции. Не существует удобного способа посева мицелия в основание агара в пробирке, поэтому мы используем другой путь. Этот метод состоит из заливки второго слоя агара, поверх вросшего мицелия. Таким образом, мицелию ничего не остается как прорости уже чистым через новый слой агара.

Вот как это делается:

1. Сделайте прививку мицелия на косой агар и дайте ему немного закрепиться на нем.

2. Приготовьте по прописи маленькое количество агаровой среды в жестяной банке с отогнутыми краями в виде носика (для удобства разлива по пробиркам среды).

3. После приготовления среды и охлаждения добавьте перекись по прописи и тщательно перемешайте.

4. Дождитесь остывания смеси почти до застывания, и в пламени спиртовки разлейте среду по пробиркам (пробирку можно покрыть слоем агара вертикально или сделать скос). Чем тоньше слой покрывающего агара, тем меньше времени потребуется мицелию для прорастания^[62].

5. Закройте пробирку пробкой.

6. Поставьте пробирки в теплое место для инкубации.

Внимание! Вынимая очищенный мицелий для пересадки, не захватите петлей первый загрязненный слой.

Посев спор.

Я обычно убеждаю потенциальных грибников начинать их грибные исследования со здоровых, чистых культур, полученных от проверенных поставщиков. Такие культуры проверены и гарантировано дадут хороший урожай при культивации. Если вы потеряете свою культуру, вы всегда сможете взять у поставщика новую чистую линию. Если вы начинаете со спор, то нет никакой гарантии, что полученная вами мицелиальная культура будет плодоносить так же хорошо и будет иметь те же особенности, что и родительский гриб, от которого получены споры. Так же вы не будете знать оптимальные условия для роста мицелия, вам придется их искать самостоятельно. Если вы потеряете свою линию, вам придется начинать все сначала.

Однако есть и положительные аргументы. Культуры, полученные из спор, обычно более энергичны, чем мицелий, полученный из пересевов. Споры могут стоить мало или совсем ничего не стоить, а чистая мицелиальная культура может оказаться очень дорогой. Споры могут быть получены из высушенного гриба, в отличие от мицелия и т. д. Таким образом, получение линии из спор может быть использовано с тем же успехом, как и из чистой линии.

В предыдущей книге я писал, что споры не могут прорастать в среде содержащей перекись.

Я получил письма от нескольких грибников. Они писали мне, что им удалось прорастить споры в присутствии перекиси. Должен признать, что это действительно возможно, если концентрация вносимых спор велика. Однако не думаю, что это хорошая идея. Проросший в этих условиях мицелий может иметь генетические повреждения. И как оказывается не особенно трудно сделать проростку спор в неперекисной среде, несмотря на возможные заражения. При применении метода посева на «косяки» шанс заражения уменьшается до минимума по сравнению с чашками Петри (большое спасибо Дэвиду Сару за то, что сообщил мне об этом подходе).

Подготовка «косяков» для проращивания спор.

Чтобы подготовить скошенный агар для спор, следуйте выше приведенной методике с небольшими изменениями. При приготовлении среды не добавляйте перекись.

1. Прогрейте подготовленную среду в скороварке в течение 10 минут.

2. Залейте расплавленную среду в пробирки.

3. Закройте пробирки пробками и стерилизуйте под давлением в скороварке.

4. Разместите пробирки с горячей средой наклонно для застывания и формирования скосов.

В качестве альтернативного метода, вы можете простерилизовать пробирки и среду раздельно, разлить среду по пробиркам в стерильных условиях.

Чтобы вырастить споры одной разновидности гриба, имеет смысл засеять 5–6 «косяков», возможна потеря пары «косяков» вследствие заражения. Часть «косяков» может не прорасти.

Получение спор.

Способы сбора спор:

1. Пропарьте несколько чашек Петри в скороварке под давлением в течение 15 мин. И охладите их^[63].

2. Выберете зрелое плодовое тело гриба, с которого вы хотите получить споры. Гриб должен быть чистым, без загрязнения землей.

3. Выберете чистую поверхность, в закрытом помещении без сильных воздушных потоков. Протрите поверхность губкой, смоченной в спирте.

4. Откройте одну из чашек Петри (можете положить крышку на край чашки), положите грибное тело в чашку так, чтобы гриб не касался дня чашки (для маленьких плодовых тел, натяните нити и положите на них гриб).

5. В зависимости от разновидности гриба, процесс сбора спор может занять некоторое время. Сбор спор можно считать законченным, когда на дне чашки появится видимый налет спор. После этого удалите гриб и закройте чашку.