Старец Амвросий родился на тамбовщине в семье сельского пономаря и получил имя Александр. Закончив тамбовскую семинарию в числе первых учеников, Александр получил место учителя липецкого духовного училища. Тяжело заболев, он дал обет в случае полного выздоровления постричься в монахи. «После выздоровления, – писал преподобный Амвросий впоследствии, – я целых четыре года все жался, не решался покончить с миром… Бывало, думаешь про себя: отныне буду молчать, не буду рассеиваться, а тут глянешь – зазовет кто-нибудь к себе в гости, и опять наболтаешься». Повторившаяся болезнь заставила Александра обратиться к известному в тех краях старцу Илариону, который посоветовал ему «итти прямо в Оптину. Можно бы поступить и в саровскую пустынь, но там уже нет таких мудрых старцев, какие были прежде», имея в виду о. Серафима. В Оптиной пустыне Александр, глубоко знавший богословие и владевший пятью языками, отрекся от своей воли и подчинил себя руководству опытных старцев. В 1842 г. Александр был пострижен в монахи с именем Амвросий и определен в число братии. В 1841 г. скончался старец Леонид и его преемник, о. Макарий, перевел Амвросия из кухни, где тот совершал послушание, к себе для письмоводства. Письма Макария, касавшиеся богословских вопросов, писал Амвросий, но их окончательная редакция принадлежала Макарию. Преподобному Амвросию принадлежал перевод «Лествицы», изданной под названием: «Святого Иоанна Лествичника, перевод Оптиной пустыни». При отъезде о. Макария по делам он передавал своих духовных детей о. Амвросию; он также поручил Амвросию во время своего отсутствия дело назидания братии и богомольцев. С 1860 г., года смерти о. Макария, св. Амвросий руководил делами старчества в обители. Одна из богомолок писала об о. Амвросии: «Я увидела его возле скита в старенькой накидке. Он шел легко и имел вид совсем не такой, как другие монахи, он шел, казалось мне, не касаясь земли. Я была сзади его, но он вдруг обратился в нашу сторону и благословил меня. Впечатление моего сердца было такое, что это, должно быть, дух ангела во плоти». Первая встреча с о. Амвросием поражала людей, которые ожидали увидеть дряхлого, строгого, молчаливого старца. На его сухоньком, старческом лице всегда отражалась какая-то светлость и беспредельная доброта. «Когда человек весь бывает внутренне соединен и растворен любовью Божией, тогда и по наружному своему виде на теле своем изъявляет светлость души своей», – так говорит Лествичник. С утра до позднего вечера к келье о. Амвросия стекались толпы людей, монахи и мирские люди. Слава об о. Амвросии распространилась не только по России, но и заграницей. К нему приезжали католики и протестанты; некоторые из них впоследствии приняли Православие. Филарет Московский прислал Амвросию в благословение образ Спасителя; у него подолгу гостили обер-прокурор Синода граф Толстой, великий князь Константин. Возле старца жил Леонтьев, в 1891 г. принявший от Амвросия тайный постриг. Увидеть старца и поговорить с ним приезжали в Оптину пустынь А. К. Толстой, Л. Толстой, Достоевский с молодым Вл. Соловьевым. Сестра Л. Толстого перешла из Белевского монастыря в Шамординскую общину, чтобы находиться под руководством о. Амвросия. Л. Толстой писал: «Этот о. Амвросий совсем святой человек. Поговорил с ним и как-то легко и отрадно стало у меня на душе. Вот когда с таким человеком говоришь, то чувствуешь близость Бога». Беседа с Л. Толстым утомила преподобного; «Горд очень», – сказал он. После кончины о. Макария важное дело издания святоотеческой литературы перешло к о. Амвросию. По достоверным свидетельствам преподобный кроме дара целительства имел дар провидческий. Последние месяцы своей жизни до своей смерти осенью 1891 г. св. Амвросий провел в уединении в основанном им Шамординском женском монастыре. Похоронен он был в Оптиной пустыне рядом со своим наставником старцем Макарием; его святые останки были обретены в 1988 г. и в этом же году юбилейный поместный собор Русской православной Церкви причислил оптинского старца Амвросия к лику святых, одновременно с глубоко почитаемым им основателем русского старчества Паисием Величковским.