Полный медицинский справочник фельдшера

Абсорбционный метод анализа

На абсорбционном методе анализа основан принцип действия самых распространенных фотометрических приборов для лабораторных исследований – спектрофотометров и фотоколориметров.

Фотоколориметры предназначены для определения количества окрашенного вещества путем измерения величины поглощения и пропускания в видимой части электромагнитного спектра.

Принцип работы колориметра

Источником света для видимого участка спектра служит вольфрамовая лампа накаливания, которая формирует световой поток.

Диафрагма из светового потока вырезает узкий луч, создавая как бы «точечный» источник света. Оптическая система формирует параллельный поток световой энергии, который проходит через полосовой фильтр. Фильтр пропускает световой поток с максимальной длиной волны в диапазоне длин волн. Площадь и форма пятна, образуемого световым потоком на чувствительной площадке детектора-фотоприемника, остается постоянной. Она не зависит в заданных пределах от объема раствора в кювете и смены кюветы в кюветном отделении.

Фотоприемник трансформирует световую энергию в электрическую. Аналоговый сигнал в виде тока преобразуется аналого-цифровым преобразователем в цифровую форму. Микро-ЭВМ пересчитывает цифровой сигнал, принятый с преобразователя, в единицы измеряемых параметров.

Основное назначение абсорбциометрических приборов – определение концентрации растворов с исследуемым веществом посредством сравнения величин поглощения или пропускания световой энергии исследуемого раствора и раствора известной концентрации. В настоящее время в КДЛ можно встретить большое разнообразие по конструкции и характеристикам колориметров, фотометров, спектрофотометров.

Приборы могут отличаться:

1) по форме представления информации (в единицах оптической плотности, в единицах концентрации, в единицах светопропускания или в любых других значениях, по которым была произведена калибровка;

2) по способу подачи в прибор исследуемого раствора (проточная кювета, коммутируемая кювета, 96-луночный планшет и т. д.;

3) по способу построения и хранения калибровочных значений (ручное, автоматическое, длительное или краткосрочное);

4) по виду источника излучения световой энергии (разнообразные лампы накаливания: вольфрамовые, импульсные, газоразрядные, светодиоды, лазеры);

5) по конструкции оптической системы (одноканальные и многоканальные).

Фотометры (колориметры) работают в спектральном диапазоне 340–700 нанометров (нм). Диапазон работы спектрофотометров значительно шире – 200–950 нм. Многие современные приборы имеют процессоры, запоминающие устройства, которые позволяют автоматизировать процесс построения градуировочных характеристик самих приборов. Современные динамометрические приборы могут работать с минимальными объемами раствора в диапазоне 10-500 мкл.