Витамины и витаминоподобные соединения в биохимии обмена веществ человека

Аналитические подходы для определения водорастворимых витаминов в основном обеспечивают следующие современные методы:

– высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ, HPLC) с УФ детекцией (методики хорошо описаны в работах.

– масс-спектрометрический анализ (MS в положительном режиме), методы изложены в работах.

– ВЭЖХ-МС (тандемная масс-спектрометрия, которая позволяет повысить чувствительность в 1000 раз по сравнению с ВЭЖХ-УФ-детектированием).

Определение водорастворимых витаминов (аналитов) проводят с использованием водной подвижной фазы с низким содержанием органического растворителя. Обычно для этих целей используют фосфатные буферный растворы (для разделения водорастворимых витаминов), а также растворы муравьиной и уксусной кислот.

Процедура предварительной подготовки образцов перед анализом методом ВЭЖХ осуществляется для выделения водорастворимых витаминов из биологических жидкостей по следующим методам:

– метод Cabo R., 2014 (сыворотка и плазма крови). ^[5^]

– метод Heydari R., 2014 (для мочи). ^[6^]

– метод Hampel D., 2012 (для грудного молока). ^[7^]

– метод van der Ham M., 2012 (для спинномозговой жидкости). ^[8^].

В общем, пробоподготовка биологических жидкостей (сыворотка и плазма крови, моча, спинномозговая жидкость) заключается в разведении и последующем центрифугировании аналитов, с осаждением белков метанолом, ацетонитрилом, трихлоруксусной кислотой, и дальнейшей экстракцией гексаном, диэтиловым эфиром, этилацетатом. Экстракция может быть осуществлена натриевой солью 1-гептансульфоновой кислоты в качестве агента, связывающего ион, и Triton X-100 в качестве поверхностно-активной фазы.

Список литературы

1. Биохимия [Электронный ресурс]: учебник / Под ред. Северина Е. С. – 5-е изд., испр. и доп. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. http://www.rosmedlib.ru/book/ISBN9785970423950.html

2. Витаминно-минеральный комплекс при беременности [Электронный ресурс] / Е. В. Ших, А. А. Абрамова – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2016. http://www.rosmedlib.ru/book/ISBN9785970436561.html

3. Витамины, макро- и микроэлементы [Электронный ресурс] / Ребров В. Г., Громова О. А. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. http://www.rosmedlib.ru/book/ISBN9785970408148.html