Новый этап в развитии книгопечатания начался в 1563 году, когда на средства царской казны в Москве была построена новая типография на Никольской улице близ Кремля. Эту типографию возглавили Иван Федорович Московит (Иван Федоров) и его ученик Петр Тимофеевич Мстиславец.
Иван Федоров в 1529–1532 годы учился на богословском факультете Краковского университета и по возвращении в Москву вошел в ближайшее окружение митрополита Макария. По протекции митрополита он получил должность диакона в храме Николы Гостунского в Московском Кремле, и именно в этом качестве он и занялся организацией печатного дела в России.
В марте 1564 года из никольской типографии вышла первая, точно датированная русская печатная книга – «Деяния двенадцати апостолов» или «Апостол». В 1565 году в этой типографии была напечатана еще одна книга – «Часословец», или «Часовник». Однако на этом, вероятнее всего, просветительская деятельность первопечатника в Москве завершилась, поскольку других книг, созданных в никольской типографии, до сих пор не обнаружено.
Иван Федоров и Петр Мстиславец в 1568 году перешли в город Заблудов – родовое владение гетмана А.А. Ходасевича, где возобновили свою просветительскую деятельность. Причины их переезда в Литву до сих пор вызывают споры у историков. Большинство из них склоны объяснять это бегство из Москвы острым конфликтом первопечатников с новым митрополитом Афанасием и его ортодоксальным окружением. Однако, по мнению академика М.Н. Тихомирова, их переезд в Литву был согласован с самим Иваном Грозным, который был заинтересован в усилении влияния Русской Церкви на территории Литвы, давно ставшей полем битвы с Римско-католической Церковью.
В Заблудове первопечатники издали всего одну книгу – «Учительское Евангелие» (1569). После чего переехали во Львов, где основали новую типографию и издали ряд книг, в том числе «Псалтырь с Часословцем» (1570) и знаменитую «Азбуку» (1574). В 1578 году они вновь «подались в бега» и осели в городе Острог, во владениях князя К.К. Острожского, где прожили около трех лет, и издали еще несколько книг, в том числе «Хронологию Андрея Рымши» (1581) и «Острожскую Библию» (1581). Последние два года своей жизни Иван Федоров провел во Львове, где скончался в 1583 году и был похоронен в Онуфриевом монастыре.
Традиции книгопечатания в Москве, и после отъезда Ивана Федорова и Петра Мстиславца в Литву, были продолжены. Однако судя по анализу шрифтов, уже в новой типографии, которую возглавили Невежа Тимофеев и Никифор Тарасиев. В 1568 году в новой типографии была напечатана еще одна церковная книга – «Псалтырь», однако в 1571 году во время набега крымского хана Девлет Гирея на Москву она сгорела.
По указанию Ивана Грозного в 1576 году, в великокняжеском охотничьем селе – Александровой слободе была основана новая типография, руководителем которой стал либо Невежа Тимофеев, либо его сын Андроник Тимофеев. В этой типографии в 1577 году был напечатан новый «Псалтырь». Но затем по неизвестным причинам книгопечатание в стране вновь прекратилось, и только в 1597 году в типографии Андроника Тимофеева был напечатан новый «Апостол».
Как и прежде, в народе слагались и лирические, свадебные песни, остроумные пословицы и поговорки, которые дошли и до наших дней, веселые частушки. Народ продолжал жить и надеяться на лучшую долю и отражал это в своем повседневном творчестве. По мнению ряда авторов, именно в XVI веке социальная тематика становится отличительной чертой всего устного народного творчества, и прежде всего, исторических песен и былин. В этом отношении особо характерна знаменитая былина «О Вавиле и скоморохах».
В середине – второй половине XVI века начинает складываться целый цикл устных народных сказаний и исторических песен, связанных с успешной политикой по укреплению единого Русского государства. Наиболее яркими произведениями устного народного творчества этого периода явились «Сказка о Барме Ярыжке – простом человеке», «Песня о русских пушкарях», «Песня о Кострюке», которые явились важнейшим этапом в развитии устного народного творчества. Появился цикл сказаний (песен) о многогранной, но крайне противоречивой государственной деятельностью царя Ивана Грозного. В «Песне о гневе Ивана Грозного на сына», «Песне об Иване Грозном и разбойниках», «Песне о встрече казаков с Иваном Грозным» и «Песне о плаче над гробом Ивана Грозного», зримо проявилась идеализация образа Ивана Грозного, и наивная вера русского народа в доброго и справедливого царя.