В июле 1944 г. «живые» пушки установили на три экспериментальных самолета Hs-129B-3 (W.Nr. 162033, 162034 и 127035), которые в августе поступили в Тарневитц, в Erprobungskommando-26, для обстрела на полигоне трофейный русских танков. Испытания завершились в сентябре с положительными результатами, после чего самолеты направили на Восточный фронт.
Крупноразмерный магазин пушки ВК-7,5 занимал всю центральную часть фюзеляжа Хеншеля, не составляя места казенным частям пушек MG-151, которые пришлось демонтировать. В ряде источников говорится о том, что Hs-129B-3 не имели и пулеметного вооружения, однако, скорее всего, пулеметы все же оставили, так как они не мешали размещению боекомплекта к 75-мм орудию. Согласно техническому описанию, составленному штабом люфтваффе, вооружение состояло из одной пушки ВК-7,5 калибра 75 мм и двух пулеметов MG-17 калибра 7,92 мм.
На первых трех Hs-129B-3 стояли прежние прицелы Реви, на машинах более позднего выпуска стали монтировать более совершенные телескопические прицелы ZFR-3. По завершению летных испытаний трех прототипов начался выпуск самолетов Hs-129B-3 на заводе в Берлин-Йоханнестали. Из-за тесноты производственных помещений, отстрел пушек на готовых самолетах производился через открытые окна заводского цеха по установленным на летном поле аэродрома мишеням. Отстрел оружия в воздухе производился на полигоне Дипензее, после чего самолеты направляли на Восточный фронт в стаффели 10.(Pz..)/SG-9 и 14.(Pz..)/ SG-9. На фронте вооруженные 75-мм пушками Хеншели добились впечатляющих результатов, имея возможность поражать даже тяжелые танки ИС. Летчики прозвали Hs-129B-3 «Buchsenoffner» - консервный нож. Конструкцией Hs-129B-3 был предусмотрен аварийный сброс гондолы 75-мм пушкой.