После легализации в 1632 г. иерархии православная церковь вступила в полосу подъема, который был связан с личностью киевского митрополита (1632—1647) Петра Могилы. Он явился инициатором нововведений, укрепивших православие. Его реформы созвучны тем, которые были осуществлены в XVI в. в католической церкви. В их основу были положены два основных принципа: укрепление церковной дисциплины и подготовка нового, более образованного поколения церковнослужителей. В 1645 г. в Киеве был издан первый православный катехизис с разъяснениями основ веры (первый католический катехизис издан в 1566 г.). С общим направлением католической реформы перекликались мероприятия, направленные на «национализацию» православия (с конца XVI в. становятся «национальными» польская, чешская и другие церкви латинского обряда). В 1643 г. П. Могила канонизировал всех печерских угодников, начал масштабные реставрационные работы Десятинной церкви, Софийского собора, Михайловской церкви Выдубицкого монастыря в Киеве. Стал утверждаться взгляд на православную церковь как на апостольскую, т. е. основанную апостолом Андреем, а поэтому равновеликую римскокатолической церкви апостола Петра.
Книгопечатание
Во второй половине XVI в. в культуре Украины происходили изменения, обусловленные последствиями Люблинской унии, проникновением в украинское общество протестантских учений, идей Позднего Возрождения. Самым заметным признаком позитивных перемен было развитие кириллического книгопечатания (после публикации Ф. Скориной «Апостола» в 1525 г. вплоть до 1562 г. кириллическое книгопечатание не возобновлялось). В 1562 г. был опубликован протестантский «Катехизис» Симона Будного. Дело продолжил Иван Федоров — основоположник устойчивой традиции кириллического книгопечатания на украинских и белорусских землях. После издания «Апостола» в Москве И. Федоров в середине 60-х гг. XVI в. бежал из России и продолжил свою деятельность сначала в Заблудове, затем в украинских Львове и Остроге. Во Львове им были изданы «Апостол» (1574) и «Букварь», а «Острожская Библия» 1581 г. венчала его книгоиздательскую деятельность. Она напечатана шестью разными шрифтами, украшена заставками, концовками, богато орнаментированными начальными буквами. Издание предназначалось для распространения не только на украинских землях, но и для «всего православного люда».
Основанная И. Федоровым Острожская типография сыграла огромную роль в развитии православной культуры Украины и Беларуси: известны 28 изданий этой типографии. После смерти И. Федорова его типографское оборудование было выкуплено Львовским братством, и кириллическое книгоиздание в Украине не прервалось. Позднее появились типографии в Стрятине, Крылосе, в Киево-Печерской лавре и других местах. Всего в 1574—1648 гг. их насчитывают около 20.
Образование в конце XVI — первой половине XVII в.
Книгопечатание на кириллице способствовало созданию на украинских землях во второй половине XVI в. православных церковно-просветительских центров. Первым из них стало имение князя Андрея Курбского Миляновичи (под Ковелем). Кружок А. Курбского был первым проявлением религиозно-культурного обновления украинско-белорусских земель.
Главным же символом «православного ренессанса» во второй половине XVI в. стала Острожская академия. Возвышение г. Острога на Волыни началось с 1574 г., когда князь Константин (Василий) Острожский перенес в него из Дубно административный центр своих огромных земельных владений. Князь собрал ученых для подготовки издания полного текста Библии, и из ученого кружка возникла Острожская школа (или академия, именно так, по-видимому, рассматривал ее сам князь, хотя и не пытался добиться для нее официального статуса). В школе преподавали «семь свободных искусств». Появление школы славяно-греко-латинского типа было настоящей революцией в образовательной православной традиции. В деятельности интеллектуального острожского кружка выделяют два периода: время подготовки издания Библии и время обострения религиозной борьбы в связи с подготовкой Брестской церковной унии. На протяжении первого периода к острожским ученым относились богослов Герасим Смотрицкий, белорусский астролог и поэт Андрей Римша, первопечатник Иван Федоров, его ученик из Заблудова Гриня Иванович, богословы Мотовило и Мартын Грабович. На втором этапе, в 90-х гг. XVI в., в Остроге работали ученые греки Эммануил Ахиллеос, Лука Сербин, Никифор Парасхес-Кантакузен, Кирилл Лукарис (будущий Александрийский и Константинопольский патриарх), Зизаний Тустановский, Демьян Наливайко. К издательской и преподавательской деятельности были привлечены протестанты Христофор Филалет (Мартын Броневский) и Каспер Лушковский, польский поэт Шимон Пекалид, львовский поэт Гаврила Дорофеевич, белорусский типограф Петр Мстиславец. Активно участвовали в деятельности ученого кружка и первые выпускники Острожской школы: богослов-галичанин Иван Княгининский, Иов Борецкий (будущий киевский митрополит) и др.