Иосиф Волоцкий поддерживал стремление московских князей к объединению и укреплению Русского централизованного государства. Своим переходом от молодого князя Волоцкого Федора на сторону великого князя Московского он показал, что является противником феодальной раздробленности. Неудивительно, что великий Московский князь Василий III, а затем цари Иван Грозный, Михаил и Алексей Романовы оказывали значительную помощь в строительстве монастыря, созданного Иосифом Волоцким. Высокий авторитет Иосифа Волоцкого привлекал к нему многих людей, которые часто обращались к нему за советом. Часто обращался за советом и помощью к Иосифу Волоцкому князь Волоколамский Борис Васильевич, а его сын Иван был крестником и духовным сыном Иосифа. Вельможи и высшие сановники считали за счастье удостоиться беседы с Иосифом, избирали его себе в духовные отцы. Женщины тоже стремились к личному общению с Иосифом, но не имея для этого возможностей, спрашивали у него советы письменно или через своих духовников. Иосиф щедро делился с нуждающимися в его помощи мудростями жизни, давал советы, поддерживал и другими способами и очень огорчался, если люди вели себя недостойно. Так, он очень сожалел, что новый князь Волоцкий Федор Борисович пировал в обители и принимал дары от старцев, брал деньги из монастырской казны в долг и возвращал их с большой задержкой или не возвращал совсем. Чинил он и другие притеснения монастырю, который тогда принадлежал вместе с владениями волоцкого князя к Новгородской епархии. Не испрашивая разрешения новгородского архиепископа Серапиона, в 1507 г. Иосиф Волоцкий обратился к митрополиту Симону и к великому князю московскому Василию III с просьбой принять его монастырь под непосредственное великокняжеское покровительство. Великий князь с удовольствием удовлетворил просьбу Иосифа Волоцкого, чем еще более озлобил против себя новгородского архиепископа Серапиона и волоцкого князя Федора Борисовича, который приходился двоюродным братом великому князю и завидовал ему. Именно после конфликта с архиепископом Серапионом Иосиф Волоцкий окончательно сформулировал свой взгляд на предназначение царской власти, обосновал необходимость сильной централизованной власти и целесообразность подчинения Церкви великокняжеской власти.
Русские великие князья, цари, знатные и богатые люди, как правило, уважительно относились к Иосифо-Волоцкому монастырю. Великий князь Московский Василий III взял монастырь под свое покровительство, под свою великокняжескую опеку в 1507 г. Его сын Иван Грозный выделял Иосифо-Волоцкий монастырь среди других, поддерживал его. Он часто приезжал в монастырь, делал крупные вклады; чтобы польстить царю, его приближенные следовали его примеру. Так, думный дворянин, глава опричного террора Малюта Скуратов (Г.Л. Скуратов-Бельский, убит в 1573 г.) делал большие вклады в монастырь. Именно по его заказу была создана икона Волоколамской иконы Божией Матери, названная позже чудотворной. Знатные и постоянные благотворители монастыря разных его лет были похоронены в монастыре: Малюта Скуратов и его отец Леонид Скуратов-Бельский, Шаховские, Гончаровы, Тютчевы, Трескины и др. За право быть похороненными в монастыре и молитвы монахов за помин души нужно было хорошо заплатить, но это не пугало состоятельных людей, особенно приближенных к первому лицу в государстве. Этот монастырь был одним из богатейших на Руси; в 1570-е гг. он имел, например, 25 тысяч десятин земли. В более поздние времена цари и императоры особым вниманием монастырь не одаривали. Более того, при императрице Екатерине II в 1764 г. было проведено изъятие церковных земельных владений в пользу государства, и жизнь в монастыре стала замирать из-за проведенной секуляризации.
Хотя Иосифо-Волоцкий монастырь был очень крупным и влиятельным религиозным центром, его собственная внутренняя жизнь была далеко не всегда ровной. Монастырская братия уважала, побаивалась, но не всегда была согласна с его игуменом, однако выступать открыто боялась. Иосифо-Волоцкий монастырь имел значительные земельные наделы и большое количество крепостных крестьян. Известны недовольства и восстания крестьян, приписанных к монастырю. В связи с усилившейся эксплуатацией в конце XVI в. произошло одно из наиболее крупных восстаний монастырских крепостных крестьян.
В ХV – ХVI вв. Иосифо-Волоцкий монастырь играл большую просветительскую роль. Он был известен своей огромной библиотекой церковной литературы, ведением летописей, переписыванием книг, нравственно-поучительных сказаний (патерики греко-русских святых), в нем было очень много ценных икон.