Не считаясь с этим, Франция заняла явно угрожающую позицию по отношению к соседней с Сиеной Флоренции. Французским наместником в Сиене был назначен флорентийский эмигрант Пьетро Строцци, злейший враг герцога Козимо Медичи, мечтавший освободить свою родину от «тирана». Это послужило поводом к открытому вмешательству Флоренции в сиенские дела — в январе 1554 г. началась флорентийско-сиенская война. В то время как флорентийцы методично занимали сиенские крепости, Строцци попытался одним ударом повергнуть врага, перенеся войну на его территорию, однако надежды на общее восстание флорентийских граждан против тирании Медичи оказались иллюзорными. 2 августа 1554 г. под Марчано франко-сиенская армия Строцци была разгромлена. Флорентийцы перешли к жесткой блокаде Сиены, и после упорной обороны в апреле 1555 г. город капитулировал. Часть территории Сиенской республики с центром в Монтальчино осталась под властью профранцузской партии, и между флорентийцами и этой «Сиенской республикой, удалившейся в Монтальчино» (таково было ее официальное название) продолжались военные действия, имевшие, однако, чисто локальное значение.
Таково было положение, когда в феврале 1556 г. в Воселле было заключено общее перемирие. Карл V, к тому времени уже отрекшийся от правления Нидерландами, Испанией и Италией в пользу своего сына Филиппа II, был заинтересован в том, чтобы процесс передачи власти проходил в спокойной обстановке. Однако рассчитанное на пять лет перемирие не продлилось и года. В роли возмутителя спокойствия на этот раз выступил римский первосвященник.
Папа Павел IV (1555–1559), из знатного рода неаполитанских эмигрантов Караффа, ненавидел властвовавших над Неаполем испанцев. Его избрание оживило надежды французских политиков на осуществление старого проекта завоевания Неаполя. Заручившись тайным военным союзом с Францией, Павел IV в своем стремлении поскорее развязать войну вел себя крайне вызывающе по отношению к Испании. В ответ на его провокации в сентябре 1556 г. испанская армия Альбы вторглась в Папское государство, и папе пришлось заключать перемирие. Чтобы не потерять союзника, Генрих II возобновил войну в январе 1557 г.
Цели вторжения большой французской армии Гиза в Италию в 1557 г. не были определены заранее и выяснялись уже по ходу дела. В соответствии с желанием папы было решено сосредоточить все усилия на завоева-вании Неаполя, но Гиз, не успев даже овладеть пограничной неаполитанской крепостью Чивителла, получил от своего двора предписание прекратить кампанию (май 1557 г.), поскольку стало ясно, что главные события развернутся на северной границе Франции, где сосредоточивались основные силы испанцев.
В июне 1557 г. войну Франции объявила Англия. Английская королева Мария Тюдор (1553–1558), еще в 1554 г. ставшая супругой испанского наследного принца Филиппа, теперь короля Филиппа II, проводила у себя в стране активную политику Контрреформации и считала своим долгом поддерживать испанскую политику.
Судьба войны решилась 10 августа 1557 г., когда в битве при Сен-Каптене была разгромлена главная французская армия и был взят в плен ее полководец, первый министр коннетабль Монморанси. Правда, вернувшийся из Италии Гиз сумел ослабить впечатление от этого разгрома, взяв у англичан Кале (январь 1558 г.), но все же военное превосходство испанской армии оставалось неоспоримым. Во Франции набирал силы протестантизм, и Генрих II чувствовал необходимость заняться внутренними делами.
Мир между Францией, с одной стороны, Испанией и Англией — с другой, был заключен в Като-Камбрези 2–3 апреля 1559 г. Франции пришлось отказаться от всех своих итальянских завоеваний (кроме марки-зата Салуццо, потерянного ею впоследствии). Савойя и Пьемонт были возвращены савойскому герцогу Эммануилу-Филиберту, победителю при Сен-Кантене. Генуя вновь вступила во владение Корсикой. Республика Монтальчино была отдана флорентийскому герцогу, которому еще в 1557 г. Испания уступила права на территорию уничтоженной Сиенской республики, оставив себе, однако, ее главные порты («президии»). Теперь, кроме этих портов и небольшой, но очень богатой республики Лукка, Тоскана была объединена, и в 1569 г. Козимо I принял титул великого герцога Тосканского.
Англии пришлось расплачиваться за чуждую ее интересам политику, уступив Франции Кале (вначале на срок, затем эта уступка превратилась в постоянную). После смерти Марии Тюдор в ноябре 1558 г. овдовевший Филипп II не стал защищать интересы ее преемницы — отказавшейся вступить с ним в брак Елизаветы. Так было покончено с последним остатком некогда огромных английских владений во Франции.
Занятые в 1552 г. французами Мец, Туль и Верден остались за Францией де-факто, без юридического обоснования, — то были не испанские, по имперские земли, а Империя после отречения Карла V фактически с Францией не воевала и мира в Като-Камбрези не подписывала.