Так и осталось бы это открытие, вероятно, чисто академическим, если бы в то же время Филип Левин ни совершил свое. Он исследовал сыворотку крови женщины, которая родила мертвого младенца с распавшейся кровью. Левин обнаружил антитела, которые прежде не встречал. Винер доказал, что сыворотка крови этой женщины вызывает агглютинацию в тех же образцах человеческой крови, которые агглютинируют и при смешении с антирезус-сывороткой. Возник вопрос: есть ли взаимосвязь между смертью ребенка и загадочным резус-фактором, который есть у одних людей, но отсутствует у других, и, судя по всему, как и прочие факторы крови, передается по наследству? Ответ вскоре был найден: если мужчина с резус-фактором крови (его кровь резус-положительна, Rh+) зачнет ребенка с женщиной, у которой в крови нет резус-фактора (ее кровь резус-отрицательна, Rh-), то ребенок унаследует от отца резус-фактор. Одновременно сыворотка крови матери формирует антитела против этого чуждого фактора. При кровообмене между матерью и плодом в ее утробе эти антитела проникают через плаценту в детское кровообращение и приводят к разрушению крови эмбриона. Так бывает, конечно, не при каждой беременности, но часто. А при первой беременности обычно вообще не проявляется, вот что самое любопытное. При второй или третьей беременности антирезус-тела в крови матери входят в силу и приводят к катастрофе. Для детей, рожденных от такой беременности, одно спасение – переливание крови до полной ее замены. Значит, чрезвычайно важно вовремя установить, какой у матери резус-фактор – положительный или отрицательный.
Само по себе наличие или отсутствие резус-фактора определить не трудно. Для этого нужна антирезус-сыворотка. Но обнаружить сформировавшиеся антирезус-факторы в сыворотке крови женщины оказалось сложно. Если подозрительную сыворотку, подлежащую исследованию, соединить с резус-положительными тестовыми кровяными тельцами, чтобы увидеть «комкование» или «некомкование» – есть ли резус-фактор, нет ли его, никакой реакции не происходит. Даже если использовать в эксперименте сыворотку, заранее знакомую и уже точно содержащую антирезус-фактор, тельца не агглютинируют. Агглютинация происходит лишь в определенных случаях. Значит, при эксперименте что-то препятствует агглютинации, которая наступает в обычных условиях тела человека и приводит к разрушению. Американцы и британцы придумывали самые разные названия для этих строптивых антител, в том числе «блокирующие резус-антитела».
Только в 1944 г. Винеру удалось подобраться к этим резус-антителам при помощи одной уловки. Сыворотка, которую он хотел исследовать на резус-антитела, была смешана с резус-положительными кровяными тельцами в физиологическом соляном растворе. Спустя немного времени Винер добавил в раствор другую сыворотку, которая, по его наблюдениям, агглютинировала резус-положительные тельца. Если теперь агглютинация не произойдет, значит, резус-позитивные тельца претерпели изменения. И заключаются эти изменения в том, что резус-антитела из исследуемой сыворотки соединились с тестовыми тельцами без видимых признаков агглютинации. Они «блокировали» агглютинирующее воздействие добавленной в раствор сыворотки и тем самым «выдали» себя. Вскоре, однако, выяснилось, что лишь часть антирезус-факторов обладает таким «блокирующим» действием и «заговорила» благодаря уловке Винера. Основная масса осталась «немой».
Сразу после окончания войны трое англичан совершили следующий решительный шаг – иммунолог Р.Р.А. Кумбс из Кембриджского университета, A. E. Mуран и Р. Р. Рэйс. Их эксперимент вошел в историю как реакция Кумбса (антиглобулиновый тест), им тоже пришлось пойти на хитрость, но теперь у них получилось охватить все антирезус-факторы. Их метод основывался на том, что антирезус-факторы содержат белок глобулин – строительный материал человеческой крови. Если в подозрительной сыворотке крови содержатся антирезус-факторы, их нужно смешать с резус-положительными кровяными тельцами, и они соединяются без реакции агглютинации. Но эти резус-антитела можно увидеть, если установить, что эритроциты имеют на своей поверхности глобулин. Трое ученых проделали следующее: впрыснули кроликам человеческий глобулин. Кровь животных выдала обычную защитную реакцию, на сей раз направленную против человеческого глобулина. От этого выработалась антиглобулиновая сыворотка, именуемая в серологии после 1945 г. сывороткой Кумбса. Теперь в раствор из резус-положительных телец и подозрительной, еще не известной сыворотки добавили сыворотку Кумбса. Если в подозрительной сыворотке содержатся антирезус-факторы, которые тайно соединились с кровяными тельцами, тогда сыворотка Кумбса вызовет агглютинацию глобулина в резус-антителах. Резус-антитела выдадут свое присутствие через реакцию глобулина.